Chapitre 3 - Épreuves

3.1 Épreuves de tuberculination pour la tuberculose bovine

Cette section porte sur la technique de tuberculination seulement. Des informations au sujet de la maladie, la tuberculose bovine, sont disponibles dans module 8.3 et sur notre site web.

La réalisation d'épreuves cutanées à la tuberculine dans les troupeaux d'animaux d'élevage est, depuis de nombreuses années, un élément fondamental de la surveillance active à la ferme dans le cadre du Programme national d'éradication de la tuberculose bovine (PNÉTB).

  • les épreuves sont également réalisées à des fins d'importation, d'exportation ou d'introduction dans les centres de production de sperme animal, ainsi que pour appuyer les enquêtes sur la maladie.
  • une épreuve de tuberculination consiste à induire une réaction d'hypersensibilité retardée à l'aide d'une injection intradermique de substances antigéniques dérivées d'une souche de laboratoire de Mycobacterium bovis (M. bovis).
  • la réaction d'hypersensibilité entraîne une accumulation de cellules et de liquides dans le derme, provoquant une tuméfaction au point d'injection.
  • chez les animaux positifs, la réaction intradermique se produit dans les 24 heures suivant l'injection, et elle devient maximale après 48 à 72 heures, caractérisée par un érythème et de la tuméfaction, mais se manifeste rarement par une induration ou une ulcération.

Les épreuves de tuberculination intradermique présentent 2 susmentionné limitations :

  • certains animaux infectés par M. bovis ne réagissent pas à l'épreuve (faux négatifs)
    • le nombre d'animaux qui entrent dans cette catégorie donne la mesure de la sensibilité de l'épreuve, la sensibilité étant la probabilité que l'épreuve permette de reconnaître comme réagissants les animaux qui sont véritablement infectés.
    • les faux négatifs résultent de diverses raisons, notamment l'utilisation de tuberculine de mauvaise qualité, une technique de tuberculination inappropriée, la chronicité et la gravité de la maladie, ou des variations concernant le moment de réalisation de l'épreuve liées au vêlage et à des épreuves de tuberculination précédentes.
  • certains animaux qui ne sont pas infectés par M. bovis réagissent à l'épreuve (faux positifs)
    • le nombre d'animaux qui entrent dans cette catégorie donne la mesure de la spécificité de l'épreuve, la spécificité étant la probabilité que l'épreuve permette de reconnaître comme négatifs les animaux qui sont véritablement non infectés.
    • la plupart des animaux ayant obtenu un résultat faux positif ont été exposés à des antigènes qui ressemblent ou qui sont identiques à ceux de la tuberculine.

La sensibilité et la spécificité sont des caractéristiques de l'épreuve cutanée à la tuberculine et ne dépendent pas de la population qui est soumise à l'épreuve (c'est-à-dire si la population est indemne de tuberculose (TB) ou effectivement atteinte de TB à une certaine prévalence).

Toutefois, la prévalence de la TB dans une population a une influence sur la probabilité qu'un animal réagissant soit vraiment infecté par M. bovis (la valeur prédictive positive d'un résultat positif).

  • les valeurs prédictives positives et négatives dépendent de la prévalence de la maladie dans la population soumise à l'épreuve.
  • plus la prévalence est élevée dans une population, plus un animal réagissant à l'épreuve de tuberculination est susceptible d'être effectivement atteint de la maladie, plus que dans le cas où l'épreuve est réalisée sur une population où la prévalence est faible.

Approvisionnement, manipulation, entreposage, utilisation et élimination de la tuberculine

Toutes les tuberculines utilisées au Canada sont produites par le Centre des produits biologiques du Laboratoire d'Ottawa à Fallowfield (LOF) de l'Agence canadienne d'inspection des aliments (ACIA).

La tuberculine bovine, un dérivé protéinique purifié (PPD) d'une culture de M. bovis, est produite par l'ACIA et contient 3250 UI dans chaque 0,1 ml.

Le bureau de district fournit la tuberculine sans frais aux vétérinaires accrédités.

  • les vétérinaires accrédités qui désirent se procurer de la tuberculine doivent communiquer avec le bureau de district.

Compte tenu que la tuberculine peut être obtenue rapidement, il est inutile d'en accumuler des stocks en prévision de besoins futurs.

  • l'accumulation entraîne une augmentation de pertes inutiles de tuberculine et donne lieu à des pénuries.

La date de péremption de la tuberculine est de 1 année à compter de la date de l'évaluation de la puissance, lorsqu'elle est manipulée et entreposée de façon adéquate, mais idéalement, il faut l'utiliser en quelques mois après la réception.

  • il importe de bien gérer les stocks de tuberculine pour qu'ils ne soient pas périmés avant leur utilisation.

Toujours vérifier la date de péremption de la tuberculine avant de l'utiliser.

  • ne pas utiliser de tuberculine périmée.
  • une épreuve de tuberculination n'est valide que si elle est réalisée avant la date de péremption indiquée sur le flacon ou à cette même date.
  • en cas d'utilisation par inadvertance de tuberculine périmée pour effectuer une épreuve officielle de dépistage de la TB, il faudra répéter l'épreuve à la fin de la période d'attente nécessaire, tel qu'il est requis pour l'épreuve de tuberculination en question.
  • communiquer immédiatement avec le bureau de district pour obtenir de plus amples renseignements.

Pour que l'épreuve soit fiable, la tuberculine doit être manipulée et utilisée selon des exigences rigoureuses :

  • entreposer la tuberculine dans un endroit frais (4 °C) et la protéger de la lumière.
    • la tuberculine exposée pendant plus que quelques heures à des températures extrêmes ou à la lumière du soleil est inutilisable.
  • toujours emballer la tuberculine avec de la glace ou des cryosacs congelés au cours du transport.
  • utiliser une technique aseptique adéquate lors de la manipulation de la tuberculine.
    • pour éviter la contamination de la tuberculine, désinfecter le bouchon du flacon après avoir retiré le sceau en aluminium.
  • se départir immédiatement de la tuberculine périmée comme suit :
    • jeter en tant que déchet biologique; ou
    • retourner au bureau de district de l'ACIA (seulement les flacons pleins et non ouverts)
  • prière de retourner aussi au bureau de district la tuberculine qui n'est plus destinée à être utilisée en pratique. (seulement les flacons pleins et non ouverts).

Il est à souligner que la tuberculine ne doit être utilisée que par des vétérinaires accrédités formés et qualifiés.

Notes sur l'épreuve de tuberculination

La réalisation de l'épreuve peut nécessiter un temps de déplacement considérable et de nombreuses heures pour soumettre tous les animaux à l'épreuve. Pour faciliter ce processus, il est important de se préparer à l'avance afin de s'assurer que tout le matériel sera disponible sur les lieux de réalisation de l'épreuve.

Seringues et aiguilles

À l'aide d'une seringue à tuberculine de 1 ml, prélever une seule dose de tuberculine. Il n'est pas permis de charger la seringue avec plusieurs doses.

Utiliser une nouvelle aiguille pour chaque animal : calibre 26, ⅜ po de long.

Il est à noter que les seringues à tuberculine peuvent être remplies de nouveau, en utilisant une nouvelle aiguille pour chaque animal.

Ne pas remplir à l'avance les seringues avec la tuberculine avant la réalisation de l'épreuve, quelles que soient les circonstances.

Épreuves disponibles

Les épreuves de tuberculination suivantes ne peuvent être réalisées que par des vétérinaires accrédités formés et qualifiés :

Remarque concernant les épreuves de tuberculination :  le test TPC chez le yak et le buffle d'Asie, le test post-axillaire chez les camélidés et le test de tuberculine à la base de l'oreille pour le porc ne sont pas des tests officiels pour la tuberculose bovine selon le PNÉTB.  et ne sont effectués que dans le cadre des programmes d'exportation testant pour les animaux vivants et le sperme (c'est-à-dire, ils sont des espèces inadmissibles à tester)

Notez qu'un vétérinaire accrédité ne peut effectuer une épreuve de tuberculination que dans l'une des espèces mentionnées ci-dessus, à condition qu'il soit autorisé dans son accord de vétérinaire accrédité.

  • pour les épreuves de tuberculination sur toute espèce non admissible non listée dans cette section, une consultation préalable et l'autorisation du bureau de district superviseur du vétérinaire accrédité sont requises AVANT la réalisation d'un test (par exemple, pour déterminer le test approprié).

Pour les vétérinaires accrédités, la formation et qualification comportent les éléments suivants :

  • une révision de cette section du manuel avec un vétérinaire de district; et
  • démonstration à la ferme par un vétérinaire de l'ACIA et pratique de la technique chez des animaux vivants.
    • le vétérinaire de district doit inscrire au dossier du vétérinaire accrédité la date et le lieu de la pratique à la ferme.

Pour assurer l'exactitude des résultats des épreuves réalisées dans le cadre du PNÉTB, il est essentiel que la même personne effectue les mesures le jour de l'injection et le jour de la lecture de ces épreuves, sauf en cas de circonstances exceptionnelles où cela s'avère impossible (absence imprévue et inévitable).

L'information devant être fournie aux propriétaires avant de tester

Avant de réaliser une épreuve de tuberculination, le vétérinaire accrédité doit s'assurer que le propriétaire est au courant des informations pertinentes, telles que les conséquences d'un résultat non négatif. Les déclarations de divulgation varient selon l'espèce testée. Peu importe l'espèce testée, le propriétaire doit être informé que:

  • l'animal ne doit pas être déporté des lieux actuels tant que les résultats finaux n'ont pas été communiqués
  • les résultats négatifs des tests n'offrent aucune exemption pour les tests existants des exigences du programme de salubrité des aliments, y compris celles pour du lait cru ou non pasteurisé
  • leurs renseignements personnels sont recueillis par l'ACIA en vertu de la Loi sur la santé des animaux afin de soutenir la gestion des maladies déclarables au Canada
  • leurs renseignements personnels seront protégés par les dispositions de la Loi sur la protection de la vie privée et seront conservés dans la Banque d'informations personnelles CFIA PPU 050 / CFIA CON 025
  • il y a un consentement implicite pour partager leurs informations personnelles avec des tiers approuvés lors de la demande de tests

Si l'animal testé est un bovin domestique (Bos taurus/indicus), un bison, un mouton domestique, une chèvre domestique ou un cervide (c'est-à-dire une espèce admissible au test pour lequel le test de tuberculination est considéré comme un test officiel pour la tuberculose bovine selon le PNÉTB), informez le propriétaire que :

  • un animal réacteur déclenchera des mesures d'enquête sur la maladie qui peuvent inclure :
    • tests supplémentaires de l'animal réacteur,
    • une enquête épidémiologique,
    • tests d'animaux supplémentaires dans des troupeaux de résidence précédents,
    • contrôles légaux de mouvement (c'est-à-dire, la quarantaine), et
    • destruction sans cruauté de l'animal ou des animaux pour faciliter les tests tissulaires confirmatoires
    • des informations supplémentaires

Si l'animal testé est un yak, un buffle d'eau asiatique, un camelidé, un porc, une espèce de mouton ou de chèvre non domestique, ou toute autre espèce non mentionnée ailleurs (c'est-à-dire, une espèce non admissible au test pour lequel le test de tuberculination n'est PAS considéré comme un test officiel pour la tuberculose bovine selon le PNÉTB), informez le propriétaire que:

  • ces espèces sont considérées comme non admissibles aux tests selon le PNÉTB et, par conséquent, il n'existe aucun test auxiliaire disponible dans le cas d'un réacteur pour écarter l'animal de toute suspicion de maladie
  • un animal réacteur déclenchera des mesures d'enquête sur la maladie qui peuvent inclure :
    • une enquête épidémiologique qui s'étend du troupeau de résidence courant à tous les troupeaux de résidence précédents de l'animal réacteur,
    • tests d'animaux supplémentaires admissibles au test dans les troupeaux de résidence courants et précédents,
    • contrôles légaux de mouvement (c'est-à-dire la quarantaine), et
    • destruction sans cruauté de l'animal ou des animaux pour faciliter les tests tissulaires confirmatoires

Activités connexes

Si le propriétaire ou l'exploitant a l'intention d'administrer des médicaments aux animaux (par exemple, vaccins, médicaments antiparasitaires) pendant qu'ils sont soumis aux épreuves de dépistage de la TB, tous les médicaments doivent être administrés lors de la lecture des épreuves de tuberculination, et non au moment de l'injection de la tuberculine.

Cela permet de récupérer les carcasses à des fins d'alimentation humaine dans le cas où les animaux doivent être détruits en raison des résultats des épreuves ou d'une blessure et d'éviter toute interférence entre les médicaments et les résultats des épreuves.

Date de l'épreuve

La date de l'épreuve de tuberculination doit être consignée sur le formulaire de rapport d'épreuve intradermique, y compris la date de l'injection de la tuberculine et la date de lecture.

  • pour des fins d'exportation et l'entrée en centre de production de sperme, la date de test est la date de lecture du test de tuberculination.
  • afin de calculer l'intervalle de temps qui s'est écoulé depuis la réalisation d'une épreuve de tuberculination, utiliser la date de l'injection de la tuberculine.

Épreuve de tuberculination au pli caudal (TPC)

Préparation

L'épreuve de TPC est l'épreuve standard officielle pour le dépistage de la TB chez les bovins, bisons, moutons et chèvres à faible risque pour la tuberculose.

Le test TPC peut être réalisé par des vétérinaires accrédités en yak et buffle d'Asie afin de répondre aux exigences d'exportation vers les États-Unis (voir module 5.2C)

  • le test TPC chez le yak et le buffle d'eau N'EST PAS reconnu comme un test de dépistage officiel selon le PNÉTB, car ces espèces sont considérées comme non admissibles au test.
  • par conséquent, les essais auxiliaires des animaux réagissants utilisant le test TCC ne sont pas une exigence selon le PNÉTB
    • bien qu'un TCC puisse être effectué pour dégager le reste des animaux en vue de l'exportation vers les États-Unis, un résultat TCC négatif ne dégage PAS un animal réagissant de suspicion de maladie aux fins d'une enquête sur les maladies domestiques

L'épreuve consiste en une injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine PPD bovine à l'un des plis caudaux avec examen et palpation au bout de 72 heures (± 6 heures) après l'injection.

Ne pas réaliser l'épreuve de TPC chez un animal ayant subi une épreuve de tuberculination de quelque nature qu'elle soit au cours des 60 jours précédents.

Préparer le matériel suivant :

tuberculine – tuberculine PPD bovine (à entreposer dans un endroit sombre à 4 °C)
seringues – seringues à tuberculine de 1 ml
aiguilles – calibre 26, ⅜ po de long
ouate absorbante
Formulaire CFIA/ACIA 1524 – Rapport d'épreuve intradermique
lampe frontale ou lampe de poche en cas de mauvais éclairage

Veiller à ce que la contention de chaque animal soumis à l'épreuve soit adéquate pour qu'il soit possible de bien identifier l'animal, préparer le point d'injection, d'injecter la tuberculine avec précision, et d'interpréter correctement les résultats de l'épreuve. Ne pas réaliser ou observer l'épreuve sans que l'animal ne soit correctement immobilisé.

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 l'identification individuelle de chaque animal soumis à l'épreuve.

Le point d'injection se trouve sur le pli sous-caudal, en position distale par rapport à la base de la queue, à bonne distance de la limite du pelage, au centre du pli.

  • la tuberculine peut être administrée du côté gauche ou du côté droit, mais adopter la même technique pour tous les animaux.
  • si une lésion est détectée sur le pli sous-caudal, utiliser le pli opposé et prendre note de ce changement.

Injection

Nettoyer le pli sous-caudal à la ouate (humectée à l'eau au besoin). Ne pas utiliser d'alcool pour nettoyer le point d'injection.

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 toutes les anomalies, lésions ou croûtes visibles autour du point d'injection pour éviter qu'elles ne soient prises par erreur pour des signes de réaction à la tuberculine.

Vérifier l'étiquette de la tuberculine pour confirmer le type – la tuberculine dérivée de M. bovis porte une étiquette orange.

Vérifier ou confirmer la date de péremption de la tuberculine par rapport à la date actuelle.

Désinfecter le bouchon en caoutchouc avec de l'alcool après avoir retiré le sceau en aluminium.

Remplir la seringue avec 0,1 ml de tuberculine. Une seule dose doit être prélevée.

D'une main, relever la queue, puis localiser les plis sous-caudaux.

Insérer l'aiguille dans le derme de la peau, sur la ligne centrale du pli sous-caudal droit ou gauche, en position distale par rapport à la base de la queue et à distance de la limite du pelage.

  • être uniforme et effectuer l'injection du même côté chez tous les animaux de l'exploitation
  • relever légèrement le bout de l'aiguille après l'insertion pour s'assurer qu'on voit bien sa forme sous la peau
  • injecter dans le derme 0,1 ml de tuberculine et retirer l'aiguille lentement.

Examiner le point d'injection afin de s'assurer que la tuberculine injectée forme une bulle bien visible et perceptible à la palpation.

  • sinon, soit que l'aiguille était insérée trop profondément ou que la dose était inadéquate.
  • dans un tel cas, l'administration de tuberculine devrait être reprise du côté opposé.

Jeter immédiatement l'aiguille dans un contenant pour objets coupants.

Lecture

Après 72 heures (± 6 heures), immobiliser l'animal et confirmer son identification.

De 1 main, relever la queue pour étirer légèrement le pli sous-caudal.

Examiner et palper le point d'injection sur la longueur du pli sous-caudal avec le pouce et l'index de l'autre main.

Consigner les résultats de l'épreuve de TPC pour chaque animal sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 comme suit :

  • négatif (Nég.) : il n'y a aucun changement visible ou palpable des tissus au point d'injection; ou
  • réagissant : il y a un changement visible ou palpable des tissus au point d'injection.
    •  en cas de doute concernant la nature de la réaction à l'épreuve de TPC, classer l'animal comme réagissant
    • contacter le bureau de district immédiatement.

Les animaux réagissants à l'épreuve de TPC sont soumis à l'épreuve de tuberculination cervicale comparative (TCC) effectuée par un vétérinaire de l'ACIA (consulter la section épreuve TCC).

  • le yak et le buffle d'Asie sont considérés comme des espèces non admissibles aux tests selon le PNÉTB et ne peuvent donc pas être retestés avec le test TCC

Toutes les épreuves de tuberculine sont officielles et doivent être consignées et transmises au bureau de district de l'ACIA de 1 des façons suivantes :

  • remplir le formulaire CFIA/ACIA 1524, y compris la section consacrée aux renseignements sur chaque animal soumis à une épreuve.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 est envoyée au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés.
    • une copie doit aussi être jointe au certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés) et au certificat pour l'entrée en centre de production de sperme (CFIA/ACIA 1634 – Certificat sanitaire pour l'admission à un centre de production de sperme ou document isolement et autorisation de sortie); ou
  • remplir en partie le formulaire CFIA/ACIA 1524, comme suit, et joindre la liste des animaux.
    • remplir toutes les sections du formulaire CFIA/ACIA 1524 (à l'exception de la section consacrée aux renseignements sur l'animal), y compris le bloc-signature où le vétérinaire accrédité certifie qu'il ou elle a soumis les animaux décrits à l'épreuve de dépistage à la date et à l'endroit indiqués.
    • joindre au formulaire CFIA/ACIA 1524 la liste de tous les animaux qui ont fait l'objet d'une épreuve de dépistage de la tuberculose et qui ont obtenu un résultat négatif.
      • à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal, ajouter l'énoncé suivant : Les (nombre d'animaux) (espèces) figurant sur la liste ont été soumis à l'épreuve à la date et à l'endroit indiqués et ont obtenu des résultats négatifs.
      • le vétérinaire accrédité devrait signer et dater la liste.
    • tous les animaux ayant obtenu des résultats non négatifs à l'épreuve doivent figurer à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 complété et la liste jointe sont envoyées au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés.
    • une copie doit aussi accompagner le certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés) et le certificat pour l'entrée en centre de production de sperme (CFIA/ACIA 1634 ou document isolement et autorisation de sortie).

Surveillance de l'épreuve de TPC : norme de rendement

L'épreuve de TPC présente une spécificité inférieure à l'idéal (variant de 97 % à 99 %), ce qui entraîne un taux de faux positifs de 1 % à 3 % par année dans une population de bétail indemne de la maladie.

  • les faux positifs indiquent que l'épreuve est réalisée correctement puisqu'en principe l'épreuve donne un certain nombre de faux positifs prévus dans un groupe d'animaux sains.

Il existe une norme de rendement minimale pour tous les inspecteurs et vétérinaires, y compris les vétérinaires accrédités qui effectuent les épreuves de TPC.

Le taux de réagissants pour chaque vétérinaire accrédité qualifié pour effectuer l'épreuve de TPC doit être surveillé et calculé en fonction du nombre d'épreuves subies par des bovins ou des bisons pour chaque période de 1 an.

  • si on obtient un taux de réagissants qui est inférieur à la norme de rendement minimale de 1 %, le problème doit être examiné et documenté, tout en prenant les mesures appropriées (c'est-à-dire davantage de formation ou de supervision)
  • si un nombre insuffisant de bovins/bisons sont testés pendant une période de 1 an pour évaluer la performance du test, cette période sera prolongée.

Les vétérinaires de district et les agents vétérinaires participant à l'évaluation des services officiels fournis par les vétérinaires accrédités doivent surveiller les taux de réagissants obtenus par les vétérinaires accrédités.

  • le non-respect de la norme minimale de rendement observé lors de l'évaluation des services fournis par des vétérinaires accrédités doit être traité conformément au Manuel de procédures de gestion des services vétérinaires accrédités afin d'améliorer les services fournis.

Les vétérinaires accrédités peuvent se voir retirer l'autorisation leur permettant d'effectuer l'épreuve de TPC dans le cas où la non-conformité à la norme minimale de rendement ne peut être corrigée.

Épreuve de tuberculination médiocervicale (TMC)

Préparation
L'épreuve de TMC est l'épreuve standard officielle pour le dépistage de la tuberculose chez les cervidés. L'épreuve consiste en une injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine PPD bovine dans la région médiocervicale avec examen visuel et palpation au bout de 72 heures (± 6 heures) après l'injection.

Ne pas réaliser l'épreuve de TMC chez un animal ayant subi une épreuve de tuberculination de quelque nature qu'elle soit au cours des 60 jours précédents.

Préparer le matériel suivant :

tuberculine – tuberculine PPD bovine (à entreposer dans un endroit sombre à 4 °C)
seringues – seringues à tuberculine de 1 ml
aiguilles – calibre 26, ⅜ po de long
ouate absorbante
tondeuse électrique avec tête numéro 40
Formulaire CFIA/ACIA 1524 – Rapport d'épreuve intradermique
lampe frontale ou lampe de poche en cas de mauvais éclairage

Veiller à ce que la contention de chaque cervidé soumis à l'épreuve soit adéquate pour qu'il soit possible de bien identifier l'animal, préparer le point d'injection, d'injecter la tuberculine avec précision, et d'interpréter correctement les résultats de l'épreuve. Ne pas réaliser ou observer l'épreuve sans que l'animal ne soit correctement immobilisé.

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 l'identification individuelle de chaque animal soumis à l'épreuve.

  • les méthodes d'identification acceptables d'un animal sont les suivantes : une étiquette approuvée (ou considérée équivalente) sous le Programme d'identification et traçabilité des animaux d'élevage (TRACE), une étiquette d'oreille de la santé des animaux (HofA), un tatouage enregistré ou une étiquette d'oreille approuvée par un organisme provincial qui réglemente les cervidés d'élevage.

Injection

Raser à la tondeuse une zone d'environ 8 cm2 dans la région médiocervicale.

Nettoyer le point d'injection à la ouate (humectée à l'eau au besoin). Ne pas utiliser d'alcool pour nettoyer le point d'injection.

  • consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 toutes les anomalies, lésions ou croûtes visibles autour du point d'injection pour éviter qu'elles ne soient prises par erreur pour des signes de réaction à la tuberculine.

Vérifier l'étiquette de la tuberculine pour confirmer le type – la tuberculine dérivée de M. bovis porte une étiquette orange.

Vérifier/confirmer la date de péremption de la tuberculine par rapport à la date actuelle.

Désinfecter le bouchon en caoutchouc avec de l'alcool après avoir retiré le sceau en aluminium.

Remplir la seringue avec 0,1 ml de tuberculine.

Insérer l'aiguille dans le derme de la peau. Relever légèrement le bout de l'aiguille après l'insertion pour s'assurer qu'on voit bien sa forme sous la peau. Injecter dans le derme 0,1 ml de tuberculine et retirer l'aiguille lentement.

Examiner le point d'injection afin de s'assurer que la tuberculine injectée forme une bulle bien visible et perceptible à la palpation.

  • sinon, soit que l'aiguille était insérée trop profondément ou que la dose était inadéquate
  • dans un tel cas, l'administration de tuberculine devrait être reprise du côté opposé du cou si possible ou à au moins 15 cm du site d'injection précédent, caudalement ou rostralement.

Jeter immédiatement l'aiguille dans un contenant pour objets coupants.

Lecture

Examiner et palper le point d'injection 72 heures (± 6 heures) après l'injection. Il est essentiel que l'éclairage soit adéquat.

Consigner les résultats de l'épreuve de TMC pour chaque animal sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 comme suit :

  • négatif (Nég.) : il n'y a aucun changement visible ou palpable des tissus au point d'injection;
  • réagissant : il y a un changement visible ou palpable des tissus au point d'injection.
    • en cas de doute concernant la nature de la réaction à l'épreuve de TMC, classer l'animal comme réagissant.
    • en cas de réacteur(s), contactez immédiatement le bureau de district

Tous les animaux classés comme réagissants à l'épreuve de TMC sont soumis à l'épreuve de tuberculination cervicale comparative (TCC) effectuée par un employé de l'ACIA (consulter la section épreuve TCC).

Toutes les épreuves de tuberculine sont officielles et doivent être consignées et transmises au bureau de district de l'ACIA de 1 des façons suivantes :

  • remplir le formulaire CFIA/ACIA 1524, y compris la section consacrée aux renseignements sur chaque animal soumis à une épreuve
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 est envoyée au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés.
    • une copie doit aussi être jointe au certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés); ou
  • remplir en partie le formulaire CFIA/ACIA 1524, comme suit, et joindre la liste des animaux.
    • remplir toutes les sections du formulaire CFIA/ACIA 1524 (à l'exception de la section consacrée aux renseignements sur l'animal), y compris le bloc-signature où le vétérinaire accrédité certifie qu'il ou elle a soumis les animaux décrits à l'épreuve de dépistage à la date et à l'endroit indiqués.
    • joindre au formulaire CFIA/ACIA 1524 la liste de tous les animaux qui ont fait l'objet d'une épreuve de dépistage de la tuberculose et qui ont obtenu un résultat négatif
      • à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal, ajouter l'énoncé suivant : les (nombre d'animaux) (espèces) figurant sur la liste ci-jointe ont été soumis à l'épreuve à la date et à l'endroit indiqués et ont obtenu des résultats négatifs.
      • le vétérinaire accrédité doit signer et dater la liste.
    • tous les animaux ayant obtenu des résultats non négatifs à l'épreuve doivent figurer à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 complété et la liste jointe sont envoyées au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés

une copie doit aussi accompagner le certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés).

Épreuve de tuberculination cervicale comparative (TCC) (pour information seulement. Ces épreuves ne sont pas effectuées par des vétérinaires accrédités)

Il est reconnu que la majorité des réacteurs aux épreuves de dépistage TPC et TMC au Canada ne sont pas liés à une infection à la tuberculose bovine.

Les épreuves subséquentes de TCC servent à éliminer la majorité des faux réacteurs aux épreuves TPC et TMC et à identifier les animaux réellement infectés.

  • les épreuves de TCC sont effectuées par des vétérinaires de l'ACIA formés et qualifiés et seulement sur les espèces admissibles aux tests (c'est-à-dire le bétail, le bison, les moutons domestiques, les chèvres domestiques et les cervidés)

L'épreuve de TCC consiste en une injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine PPD bovine et de 0,1 ml de tuberculine PPD aviaire dans la région cervicale.

  • cette épreuve est basée sur l'hypothèse selon laquelle M. bovis est quelque peu différent du point de vue antigénique de M. avium et des espèces apparentées. Ainsi, on peut prévoir des réactions différentes chez un hôte après injection simultanée de PPD aviaire et de PPD bovine, selon le type d'infection qui est présente.
    • un animal infecté par M. bovis présentera une réaction plus importante au point d'injection de la tuberculine PPD bovine qu'à celui de la tuberculine PPD aviaire.

Les animaux négatifs à l'épreuve de TCC ne seront pas sujets à d'autres mesures d'investigation.

Tout animal ayant un résultat positif à l'épreuve de TCC est considéré suspect de tuberculose et est ordonné à l'abattage (avec compensation financière) pour faire des épreuves de confirmation supplémentaires.

  • un examen post-mortem détaillé sera effectué, tout tissu anormal sera analysé en laboratoire de même qu'un échantillonnage de tissu d'apparence normale.
  • si les analyses en laboratoire permettent d'isoler et d'identifier M. bovis, des activités d'éradication seront entreprises à la ferme.

Pour des fins d'exportation, même si les réacteurs aux épreuves de TPC et TMC sont confirmés négatifs grâce à l'épreuve de TCC, ces animaux ne sont pas éligibles à l'exportation

  • leurs congénères ayant obtenu un résultat négatif aux épreuves TPC ou TMC sont généralement éligibles. Contacter votre vétérinaire de district pour de plus amples informations.

Pour que l'épreuve de TCC soit efficace, elle doit être effectuée à un intervalle précis suite aux épreuves de dépistage de TPC ou TMC. Même si cette période d'attente peut représenter un inconvénient pour le producteur, ce délai est préférable au risque de ne pas détecter un animal infecté qui va répandre la maladie.

L'épreuve de TCC peut être réalisée comme suit :

  • jusqu'à 10 jours après l'injection de l'épreuve de TPC (bovins et bisons seulement);
  • pour des fins d'exportation aux États-Unis seulement, l'épreuve de TCC peut aussi être appliquée aux cervidés réagissants à l'épreuve de TMC jusqu'à 10 jours après l'injection de l'épreuve de TMC, dans le but de qualifier les congénères si le résultat de l'épreuve de TCC est négatif;
  • au moins 60 jours après l'injection de l'épreuve de TPC (bovins, bisons, moutons, chèvres); ou
  • au moins 60 jours après l'injection de l'épreuve de TMC (cervidés).

Toutes les épreuves de TCC ultérieures ne doivent pas être répétées avant au moins 60 jours.

Épreuve de tuberculination post-axillaire simple chez les camélidés

Préparation

L'épreuve de tuberculination intradermique à la région post-axillaire est une épreuve standard pour détecter la tuberculose chez les camélidés du Nouveau Monde (lamas, alpagas) et de l'Ancien Monde (chameaux).

Bien que cette épreuve ne soit pas validée pour être utilisée dans le cadre d'un programme national de lutte contre la TB, elle est réalisée au Canada dans le cadre de programmes d'exportation et d'importation d'animaux vivants.

  • pour réaliser l'épreuve, suivre les procédures exposées dans la présente section, à moins que le certificat sanitaire d'exportation n'en dispose autrement.

L'épreuve consiste en une injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine PPD bovine dans la peau, derrière la région axillaire et le coude de l'animal, avec examen, palpation et mesure au bout de 72 heures (± 6 heures) après l'injection.

La réaction à l'épreuve se manifeste par des changements relativement mineurs au niveau de l'épaisseur de la peau, c'est pourquoi il est impératif d'utiliser une méthode très stricte pour réaliser cette épreuve.

  • les mesures dépendent de la tension de la peau (liée à la position et à la contention de l'animal), de la pression exercée sur la peau par le compas d'épaisseur et de la quantité de peau prise pour faire les mesures.
  • faire tout ce qui est possible pour normaliser ces conditions lors de l'injection et de la lecture.

Remarque : ne pas réaliser cette épreuve chez un animal ayant subi une épreuve de tuberculination de quelque nature qu'elle soit au cours des 90 jours précédents.

S'assurer que l'épreuve est réalisée par un vétérinaire accrédité formé et qualifié, en respectant les exigences du pays importateur.

Préparer le matériel suivant :

tuberculine – tuberculine PPD bovine (à entreposer dans un endroit sombre à 4 °C)
seringues – seringues à tuberculine de 1 ml
aiguilles – calibre 26, ⅜ po de long
ouate absorbante
tondeuse électrique avec tête numéro 40
compas d'épaisseur
Formulaire CFIA/ACIA 1524 – Rapport d'épreuve intradermique
lampe frontale ou lampe de poche en cas de mauvais éclairage

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 l'identification individuelle de chaque animal soumis à l'épreuve.

  • les méthodes d'identification acceptables sont les suivantes : une étiquette d'oreille HofA, un tatouage enregistré ou le numéro d'une micropuce si un lecteur est disponible.

Injection

Veiller à ce que la contention de chaque animal soumis à l'épreuve soit adéquate pour qu'il soit possible de bien identifier l'animal, de préparer le point d'injection, d'effectuer des mesures précises avant l'injection, d'injecter la tuberculine avec précision, de procéder avec soin à la palpation, et d'effectuer des mesures précises après l'injection.

Préparer le point d'injection en rasant à la tondeuse une zone de 8 cm2 sur la face latérale de la paroi thoracique, dans la région axillaire située à proximité du coude.

Nettoyer le point d'injection à la ouate (humectée à l'eau au besoin). Ne pas utiliser d'alcool pour nettoyer le point d'injection. Examiner et palper le point d'injection, puis consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524) toutes les anomalies, lésions ou croûtes visibles autour du point d'injection pour éviter qu'elles ne soient prises par erreur pour des signes de réaction à la tuberculine.

Avant d'injecter la tuberculine, relever le pli de la peau située au centre de la zone injection; placer le compas d'épaisseur sur le pli, ajuster le compas de façon à ce qu'il tienne la peau, mais qu'il soit possible de le retirer; retirer le compas d'épaisseur et lire la mesure à 0,5 mm près

  • consigner la mesure sur le formulaire CFIA/ACIA 1524.

Remarque : effectuer une seule mesure à l'aide du compas d'épaisseur au niveau du point d'injection. Ne pas tenir compte de cette première mesure dans le seul cas où des problèmes sont rencontrés lors de la mesure, il faudra alors répéter toute la procédure. Des mesures répétées entraîneront un « aplatissement » de la peau.

Prélever 0,1 ml de tuberculine PPD bovine dans la seringue. Injecter 0,1 ml de tuberculine dans la couche intradermique au centre de la zone injection, en relevant légèrement la pointe de l'aiguille l'injection pour bien voir sa forme juste sous la peau. Retirer lentement.

Examiner le point d'injection afin de s'assurer que la tuberculine injectée forme une bulle bien visible et perceptible à la palpation.

  • sinon, soit que l'aiguille était insérée trop profondément ou que la dose était inadéquate.
  • l'administration de tuberculine devrait être reprise sur l'autre côté dans ce cas.

Jeter immédiatement l'aiguille dans un contenant pour objets coupants.

Lecture

Examiner et palper le point d'injection sous un bon éclairage au bout de 72 heures (± 6 heures) après l'injection et localiser l'aire où la réaction est la plus importante. Il convient de noter que, chez les camélidés, la réaction au point d'injection est souvent diffuse. La réaction peut être également très variable.

Relever le pli de la peau située dans l'aire où la réaction est la plus importante ou à défaut, au centre de la zone injection et mesurer l'épaisseur du pli à l'aide du même compas d'épaisseur utilisé le jour de l'injection et selon la même procédure suivie le jour de l'injection, à 0,5 ml près

  • consigner la mesure à 0,5 mm près sur le formulaire CFIA/ACIA 1524.

Remarque : effectuer une seule mesure à l'aide du compas d'épaisseur au niveau du point d'injection. Ne pas tenir compte de cette première mesure dans le seul cas où des problèmes sont rencontrés lors de la mesure, il faudra alors répéter toute la procédure. Des mesures répétées entraîneront un « aplatissement » de la peau.

Soustraire la valeur de la mesure effectuée avant l'injection de celle de la mesure effectuée après l'injection et consigner la différence sur le formulaire CFIA/ACIA 1524. Cette valeur est la « valeur de la différence d'épaisseur de la peau ».

Interpréter la « valeur de la différence d'épaisseur de la peau » conformément aux exigences applicables en matière d'exportation ou d'importation. Si l'interprétation n'est pas spécifiée, classer le résultat de l'épreuve de tuberculination pour chaque animal de la manière suivante et le consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 :

  • négatif (Nég.) : il n'y a aucune réaction visible ou palpable au point d'injection, et la « valeur de la différence d'épaisseur de la peau » est inférieure à 1,5 mm; ou
  • réagissant : il y a une réaction visible ou palpable au point d'injection, ou la « valeur de la différence d'épaisseur de la peau » est égale ou supérieure à 1,5 mm.
    • contacter immédiatement le bureau de district de l'ACIA.

Toutes les épreuves de tuberculine doivent être consignées et transmises au bureau de district de l'ACIA de l'une des façons suivantes :

  • remplir le formulaire CFIA/ACIA 1524, y compris la section consacrée aux renseignements sur chaque animal soumis à une épreuve.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 est envoyée au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés.
    • une copie doit aussi être jointe au certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés); ou
  • remplir en partie le formulaire CFIA/ACIA 1524, comme suit, et joindre la liste des animaux.
    • remplir toutes les sections du formulaire CFIA/ACIA 1524 (à l'exception de la section consacrée aux renseignements sur l'animal), y compris le bloc-signature où le vétérinaire accrédité certifie qu'il ou elle a soumis les animaux décrits à l'épreuve de dépistage à la date et à l'endroit indiqués.
    • joindre au formulaire CFIA/ACIA 1524 la liste de tous les animaux qui ont fait l'objet d'une épreuve de dépistage de la tuberculose et qui ont obtenu un résultat négatif
      • à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal, ajouter l'énoncé suivant : Les (nombre d'animaux) (espèces) figurant sur la liste ci-jointe ont été soumis à l'épreuve à la date et à l'endroit indiqués et ont obtenu des résultats négatifs.
      • le vétérinaire accrédité devrait signer et dater la liste.
    • tous les animaux ayant obtenu des résultats non négatifs à l'épreuve doivent figurer à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 complété et la liste jointe sont envoyées au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés
    • une copie doit aussi accompagner le certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés).

Épreuve de tuberculination à la base de l'oreille chez les porcs

Préparation

L'épreuve de tuberculination intradermique à la base de l'oreille est l'épreuve standard pour détecter la tuberculose chez les porcs.

Bien que ce test ne soit pas reconnu comme un test officiel selon le PNÉTB, l'épreuve de tuberculination intradermique à la base de l'oreille est réalisée dans le cadre du Programme d'Insémination Artificielle et à des fins d'exportation d'animaux vivants.

  • utilisez les procédures de test de cette section, sauf indication contraire du certificat sanitaire de l'exportation

L'épreuve consiste en une injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine PPD bovine dans la peau située à la base de l'oreille, avec examen et palpation au bout de 48 heures après l'injection.

Remarque : ne pas réaliser cette épreuve chez un animal ayant subi une épreuve de tuberculination de quelque nature qu'elle soit au cours des 60 jours précédents.

Veiller à ce que l'épreuve soit réalisée par un vétérinaire accrédité formé et qualifié, en respectant les exigences du pays importateur.

Préparer le matériel suivant :

tuberculine – tuberculine PPD bovine (à entreposer dans un endroit sombre à 4 °C)
seringues à tuberculine de 1 ml
aiguilles – calibre 26, ⅜ po de long
ouate absorbante
Formulaire CFIA/ACIA 1524 – Rapport d'épreuve intradermique
lampe frontale ou lampe de poche en cas de mauvais éclairage

Veiller à ce que la contention de chaque porc soumis à l'épreuve soit adéquate pour qu'il soit possible de bien lire le numéro d'identification de l'animal, d'injecter la tuberculine avec précision, et d'interpréter correctement les résultats de l'épreuve. La méthode de contention utilisée peut être modifiée en fonction du tempérament et du poids du porc. Ne pas réaliser ou observer l'épreuve sans que l'animal ne soit correctement immobilisé.

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 l'identification individuelle de chaque animal soumis à l'épreuve.

les méthodes d'identification acceptables d'un animal sont les suivantes : une étiquette approuvée (ou considérée équivalente) sous le Programme d'identification et traçabilité des animaux d'élevage (TRACE) ou une étiquette d'oreille HofA (Health of Animals = Santé des animaux).

Injection

Le point d'injection de la tuberculine chez les porcs se situe au niveau de la face dorsale de l'oreille, juste en avant de la base. La tuberculine peut être administrée du côté gauche ou du côté droit, mais l'injection doit être effectuée du même côté chez tous les animaux.

Nettoyer la face dorsale de la base de l'oreille à la ouate (humectée à l'eau au besoin). Ne pas utiliser d'alcool pour nettoyer le point d'injection.

Consigner sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 toutes les anomalies, lésions ou croûtes visibles autour du point d'injection pour éviter qu'elles ne soient prises par erreur pour des signes de réaction à la tuberculine.

Vérifier l'étiquette de la tuberculine pour confirmer le type – la tuberculine dérivée de M. bovis porte une étiquette orange.

Vérifier/confirmer la date de péremption de la tuberculine par rapport à la date actuelle.

Désinfecter le bouchon en caoutchouc avec de l'alcool après avoir retiré le sceau en aluminium.

Remplir la seringue avec 0,1 ml de tuberculine.

En se tenant de 1 côté du porc, insérer l'aiguille dans le derme de la peau à la base de l'oreille. S'assurer que l'on peut bien voir la forme du biseau de l'aiguille juste sous la peau, puis injecter 0,1 ml de tuberculine et retirer l'aiguille doucement.

Examiner le point d'injection afin de s'assurer que la tuberculine injectée forme une bulle bien visible et perceptible à la palpation. Sinon, soit que l'aiguille était insérée trop profondément ou que la dose était inadéquate.

  • l'administration de tuberculine devrait être reprise sur l'autre oreille dans ce cas.

Jeter immédiatement l'aiguille dans un contenant pour objets coupants.

Lecture

Examiner et palper le point d'injection 48 heures après l'injection. Il est essentiel que l'éclairage soit adéquat.

À moins que le pays importateur prévoie une interprétation différente, consigner le résultat de l'épreuve sur le formulaire CFIA/ACIA 1524 comme suit :

  • négatif (Nég.) : il n'y a aucun changement visible ou palpable des tissus au point d'injection; ou
  • réagissant : il y a un changement appréciable visible ou palpable des tissus au point d'injection.  Aviser le bureau de district de l'ACIA.

Il n'existe pas de test comparé auxiliaire disponible.

Chaque fois qu'un porcin est classé comme réagissant, il faut mener une enquête afin de déterminer s'il a été en contact avec des espèces admissibles aux tests (c'est-à-dire bovins, bisons, moutons domestiques, chèvres domestiques et cervidés) depuis sa naissance.

  • si c'est le cas, le troupeau auquel appartient l'espèces admissibles aux tests doit être examiné et soumis à des épreuves par des employés de l'ACIA.

Le devenir d'un porcin ayant réagi à l'épreuve est déterminé par les normes du programme dans le cadre duquel l'animal a subi l'épreuve, et il se peut que l'on soumette de nouveau le réagissant à l'épreuve après au moins 60 jours ou qu'on le retire du centre de production de sperme ou de l'envoi destiné à l'exportation.

Toutes les épreuves de tuberculine sont officielles et doivent être consignées et transmises au bureau de district de l'ACIA de 1 des façons suivantes :

  • remplir le formulaire CFIA/ACIA 1524 y compris la section consacrée aux renseignements sur chaque animal soumis à une épreuve
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 est envoyée au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés.
    • une copie doit aussi être jointe au certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés) et au certificat pour l'entrée en centre de production de sperme (CFIA/ACIA 1634 ou document isolement et autorisation de sortie); ou
  • remplir en partie le formulaire CFIA/ACIA 1524 comme suit, et joindre la liste des animaux.
    • remplir toutes les sections du formulaire CFIA/ACIA 1524 (à l'exception de la section consacrée aux renseignements sur l'animal), y compris le bloc-signature où le vétérinaire accrédité certifie qu'il ou elle a soumis les animaux décrits à l'épreuve de dépistage à la date et à l'endroit indiqués.
    • joindre au formulaire CFIA/ACIA 1524 la liste de tous les animaux qui ont fait l'objet d'une épreuve de dépistage de la tuberculose et qui ont obtenu un résultat négatif.
      À la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal, ajouter l'énoncé suivant : Les (nombre d'animaux) (espèces) figurant sur la liste ci-jointe ont été soumis à l'épreuve à la date et à l'endroit indiqués et ont obtenu des résultats négatifs.
    • le vétérinaire accrédité devrait signer et dater la liste.
    • tous les animaux ayant obtenu des résultats non négatifs à l'épreuve doivent figurer à la section du formulaire CFIA/ACIA 1524 consacrée aux renseignements sur l'animal.
    • une copie du formulaire CFIA/ACIA 1524 complété et la liste jointe sont envoyées au bureau de district responsable de la région où les animaux ont été testés
    • une copie doit aussi accompagner le certificat zoosanitaire d'exportation envoyé pour endossement au district (s'il s'agit d'un district différent de celui où les animaux ont été testés) et le certificat pour l'entrée en centre de production de sperme (CFIA/ACIA 1634 ou document isolement et autorisation de sortie).

3.2 Épreuves sérologiques

Ce module du Manuel du vétérinaire accrédité fournit les renseignements suivants nécessaires aux épreuves sérologiques :

L'information sur les tests spécifiques requis pour chaque activité se trouvent dans le(s) module(s) concerné(s) de ce manuel.

Objectifs

Selon l'article 2. du Règlement sur la santé des animaux, le terme « épreuve » comprend :

  • le prélèvement de tissus ou de liquides d'un animal (par exemple, du sérum);
  • une injection pratiquée sur un animal pour déterminer s'il est atteint d'une maladie (par exemple, épreuve à la tuberculine comme expliqué dans le module 3.1).

La fiabilité d'une épreuve diagnostique est directement liée à la nature des spécimens ou échantillons reçus et à leur état. Le laboratoire doit recevoir un échantillon de bonne qualité aux fins diagnostiques.

Prélèvement, matériel et fournitures

Il est extrèmement important que les animaux soient correctement identifiés.

À moins d'indication contraire, il faut au minimum 1 ml de sérum pour chaque épreuve demandée.

Un échantillon distinct doit être envoyé pour chaque analyse demandée, même si les différentes épreuves sont effectuées au même laboratoire.

  • les laboratoires préfèrent des échantillons de sérum séparés afin de préserver l'intégrité de l'échantillon.
  • par exemple, pour des épreuves de dépistage de brucellose et de leptospirose, il faut deux échantillons de 1 mL.

Pour le sérum :

  • utilisez des tubes siliconés (à bouchon rouge) ou des tubes séparateurs de sérum (SST)
    • Remarques concernant l'usage des tubes séparateur de sérum :  Une centrifugeuse produisant une force centrifuge relative minimale (RCF) de 1100-1300 RCF est requise si le vétérinaire accrédité prévoit utiliser des tubes séparateurs de sérum (SST) pour l'échantillonnage sanguin.  Ne conservez pas le sang entier dans des tubes SST pendant de longues périodes, surtout en cas d'exposition à des températures plus chaudes, car cela entraînerait une lixiviation du gel de séparation sérique dans l'échantillon, ce qui nuit aux tests sérologiques. De plus, le tube SST centrifugé seul n'empêchera pas l'hémolyse ni la fuite des composants des cellules sanguines à travers le bouchon vers la fraction sérique.  Les échantillons doivent être décantés sans délai dans de nouveaux tubes siliconés à bouchon rouge et ne jamais être expédiés au laboratoire par tubes SST.
  • utilisez des aiguilles à usage unique;
  • utilisez un marqueur à encre indélébile pour numéroter les tubes
  • centrifugez les tubes et aliquotez dans des tubes individuels à bouchon rouge pour chaque test requis
    • les petits tubes de prélèvement (3 ml) munis ou non d'un capuchon à filet interne sont à éviter, car ils sont sujets aux fuites et peuvent entraîner des problèmes techniques pour le laboratoire.
  • le sérum devrait être gardé réfrigéré jusqu'à l'envoi.  Si un délai dans l'expédition vers le laboratoire est prévu, le sérum doit être congelé lorsque cela est approprié selon le test.
    • Vérifiez toujours les exigences spécifiques de manipulation et d'expédition des échantillons pour chaque type d'échantillon et test

Les coûts liés au matériel et aux fournitures sont la responsabilité du vétérinaire accrédité.

Préparation et emballage des échantillons de sérum

Inscrivez sur chaque tube, à l'encre indélébile, le numéro correspondant au numéro inscrit sur le formulaire d'envoi d'échantillons (dans la colonne « Numéro d'ampoule »). Il faut écrire le numéro sur le tube, et non sur le bouchon.

Lors de la soumission d'échantillons réplicatifs (c'est-à-dire le même échantillon prélevé sur un un animal en une journée) pour plusieurs tests sur le même animal, identifiez chaque flacon avec le même numéro de tube indiqué sur le formulaire de soumission

  • si des échantillons sont envoyés à plusieurs laboratoires, les numéros de tubes resteront tous identiques pour les échantillons réplicatifs

Pour les échantillons pairés du même animal, ils doivent être identifiés avec le même numéro.

  • la lettre A sera inscrite pour identifier l'échantillon aigu (le plus vieux) et la lettre C sera inscrite pour identifier l'échantillon convalescent (le plus récent) (par exemple : 001A, 001C, 002A, 002C, 003A, 003C, etc.)

Le vétérinaire accrédité doit s'assurer que les méthodes d'emballage et d'expédition des échantillons sont conformes aux règlements en vigueur pour ce type d'échantillons.

  • la majorité des échantillons recueillis dans le cadre du programme des vétérinaires accrédités seront classés comme « spécimens animaux exemptés » en vertu du Règlement sur le transport des marchandises dangereuses.
    • les spécimens animaux exemptés sont définis comme « Les échantillons animaux qui ne sont pas présumés contenir des matières infectieuses (par exemple échantillons prélevés à des fins de surveillance ou d'exportation) ou dans lesquels les agents pathogènes ont été neutralisés ou inactivés ».
    • pour les échantillons ne répondant pas à cette définition, consultez votre vétérinaire de district pour connaître la classification appropriée et les procédures d'expédition requises.
  • consultez la figure suivant pour connaître les normes à respecter lors de l'expédition d'un spécimen animal exempté.

Liste de contrôle relative aux inscriptions sur l'emballage extérieur

  • Nom, adresse et numéro de téléphone de l'expéditeur et du destinataire.
  • Les mots – « Spécimen animal exempté » sur l'emballage.

Mentions sur le bordereau d'expédition de l'envoyeur

  • Remarque – Spécimen animal exempté

Remarque : si plusieurs contenants primaires fragiles sont placés dans un seul emballage secondaire, il faut qu'ils soient emballés individuellement ou séparés pour empêcher tout contact entre eux.

Longue description

Représentation graphique des normes minimale d'emballage d'expédition requises pour les spécimens animaux exemptés

Emballage extérieur

Emballage secondaire étanche aux liquides ou aux pulvérulents (par exemple sac de plastique scellé)

Récipient primaire étanche aux liquides ou aux pulvérulents

Échantillon

Matériau d'emballage absorbant (pour les liquides)

Emballer les ampoules dans des boîtes conçues à cet effet de manière à prévenir les bris (par exemple, utiliser une boîte New York ou une boîte en polystyrène pour l'envoi des ampoules).

  • l'utilisation d'un contenant approprié est une exigence lorsque des échantillons sont soumis au laboratoire.
  • l'expéditeur est tenu, légalement aussi bien que moralement, d'assurer la sécurité des personnes manipulant les échantillons au cours du transport et en laboratoire.

Les formulaires de demande d'analyse qui accompagnent les prélèvements doivent être insérés dans une enveloppe qui sera apposée à l'extérieur de l'emballage de protection.

Laboratoires

La plupart des épreuves prévues par la Loi sur la santé des animaux et ses règlements ou exigées expressément par un pays importateur sont réalisées dans un laboratoire de l'ACIA ou un laboratoire approuvé par l'ACIA, à moins d'indication contraire (voir Module 3.6).

  • les laboratoires « approuvés par l'ACIA » sont les laboratoires privés qui sont spécifiquement approuvés par l'ACIA pour effectuer les épreuves officielles d'anémie infectieuse des équidés (AIE) ou de brucellose soumises par des vétérinaires accrédités.

Dans les cas où les tests requis ne sont pas disponibles dans nos laboratoires ou dans un laboratoire approuvé par l'ACIA, le manuel du vétérinaire accrédité spécifiera que l'épreuve peut être effectuée dans un laboratoire privé qui rencontre les exigences de la Politique sur le recours aux services d'analyse de laboratoires externes pour la certification des exportations.

  • avant de soumettre un échantillon, le vétérinaire accrédité doit vérifier auprès du bureau de district que le laboratoire répond aux exigences requises.

Le vétérinaire accrédité doit assumer les frais d'expédition et d'analyse de laboratoire.

Sauf indication contraire, tous les échantillons soumis à un laboratoire de l'ACIA ou approuvé par l'ACIA doivent être accompagnés d'un formulaire approuvé par l'ACIA pour l'épreuve officielle demandée.

  • veuillez contacter directement le laboratoire approuvé par l'ACIA pour confirmer quelle documentation ou notification est requise pour soumettre des échantillons (voir Module 3.6)

Peu importe le type de soumission effectuée, il incombe au vétérinaire accrédité de fournir toutes les informations requises.

  • les laboratoires peuvent refuser d'effectuer l'analyse des échantillons soumis avec des formulaires qui ne sont pas entièrement remplis
  • veuillez consulter votre vétérinaire de district pour obtenir des conseils sur la complétion des formulaires et des instructions sur la distribution de ceux-ci pour les échantillons envoyés aux laboratoires de l'ACIA

Formulaires de soumission et procédures

Le vétérinaire accrédité peut se procurer les formulaires nécessaires pour les échantillons soumis aux laboratoires de l'ACIA au bureau de district de l'ACIA.

Pour les détails sur les formulaires de soumission pour l'AIE, la brucellose ou la leucose bovine enzootique, consultez les sections pertinentes ci-dessous

Tests d'exportation et d'insémination artificielle dans les laboratoires de l'ACIA

  • utilisez le formulaire CFIA/ACIA 5473 – Soumission d'échantillons pour l'importation, l'exportation et l'insémination artificielle.
  • les directives sur la façon de transmettre les échantillons sont inscrites sur ce formulaire
    • il convient de noter que chaque formulaire CFIA 5473 porte un numéro de référence unique et ne peut être utilisé qu'une seule fois
    • ne faites pas de photocopies de ces formulaires pour d'autres soumissions
    • faites des photocopies des formulaires remplis lors de l'envoi d'échantillons de la même soumission à plusieurs laboratoires pour analyse
  • un numéro de notification de laboratoire, disponible par l'entremise d'un vétérinaire de district de l'ACIA, doit être inscrit dans la section « Motif du test » du formulaire CFIA/ACIA 5473.
    • s'assurer que le bon numéro de notification pour les échantillons testés est utilisé
    • pour les échantillons prélevés dans le cadre du programme IA, cochez également la case correspondant à l'étape appropriée du test (c'est-à-dire; FAI - à la ferme, IAI - isolement pré-entrée, AAI - annuels ou SAI - tests semestriels pour résidents)
  • Le numéro de l'envoyeur du vétérinaire accrédité est le numéro d'enregistrement tel qu'indiqué sur la première page de l'entente du vétérinaire accréditée (Formulaire CFIA/ACIA 1625) authorisée
    • ce numéro d'enregistrement correspond à la province où le bureau de district supervisant l'envoyeur est situé (autrement dit, le district avec qui le vétérinaire accrédité a signé son formulaire 1625)
    • ce numéro est toujours le même, peu importe l'endroit où les échantillons ont été prélevés.
  • pour chaque épreuve demandée, un prélèvement de sérum et une copie dûment remplie du formulaire approprié doit être envoyé à chaque laboratoire.
    • Les codes de test pour les échantillons soumis par les vétérinaires accrédités aux laboratoires de l'ACIA peuvent être trouvés au module 10.1A
  • une copie du formulaire de soumission doit être conservée en dossier et une copie doit être transmise au bureau de district lors de soumission dans un laboratoire de l'ACIA

Les soumissions numérique (AIE)

Actuellement, une voie de soumission numérique existe uniquement pour les tests AIE – voir la section 3.2A (tests AIE).

Expédition des échantillons

Joignez tous les formulaires pertinents/requis aux échantillons.

lorsque vous envoyez des échantillons à plusieurs laboratoires dans le cadre d'une même soumission, incluez une copie du formulaire de soumission applicable à chaque laboratoire

  • veuillez contacter le laboratoire approuvé par l'ACIA pour confirmer quelle documentation ou notification est requise lorsqu'un système de certification numérique pour l'AIE approuvé par l'ACIA est utilisé pour soumettre des échantillons (coordonnées disponibles au Module 3.6).

Ne jamais confier au propriétaire de l'animal ou à l'exportateur l'envoi des échantillons.

  • le vétérinaire accrédité doit être en mesure de maintenir la chaîne de contrôle des échantillons qu'il expédie aux laboratoires.
  • les échantillons à expédier peuvent être regroupés à un emplacement intermédiaire dans un envoi plus important à condition que les échantillons ne soient pas ouverts et/ou réemballés après avoir quitté la possession du vétérinaire accrédité.

Une fois prélevés, les échantillons sont préparés, réfrigérés et envoyés au laboratoire sans délai.

  • Si l'envoi est retardé, consultez le laboratoire applicable pour savoir si les échantillons peuvent être congelés ou non selon le type de test demandé

N'envoyez les échantillons qu'en semaine pour éviter qu'ils soient retenus en cours de transport ou que leur analyse soit retardée en laboratoire à cause de la fin de semaine ou d'un congé.

  • il est conseillé de n'envoyer les échantillons que du lundi au mercredi, sauf si la réception au laboratoire peut être garantie avant sa fermeture pour la fin de semaine.
  • soyez particulièrement attentifs aux fermetures associées aux jours fériés

Tout facteur qui influe sur la viabilité de l'agent en question affectera la sensibilité de l'épreuve et par conséquent la fiabilité des résultats.

Des ampoules brisées nécessiteront un nouveau prélèvement, ce qui retarde sensiblement l'obtention des résultats des épreuves.

Il incombe au vétérinaire accrédité d'envoyer de nouveaux prélèvements lorsque les premiers sont impropres à l'analyse.

  • Consultez le Module 3.7 ci-dessous pour les causes courantes d'échantillons « impropres ».

Le vétérinaire accrédité doit assumer les frais d'expédition.

  • si par erreur les échantillons sont envoyés à un laboratoire de l'ACIA n'effectuant pas les analyses demandées, le laboratoire peut, par courtoisie, faire suivre au laboratoire approprié, si le vétérinaire accrédité accepte de défrayer les coûts d'envoi en fournissant son numéro de compte de service de messagerie.

3.2A – Épreuves d'anémie infectieuse des équidés (AIE)

Dans cette section :

Consultez le module 8.4 de ce manuel pour des informations spécifiques à la maladie concernant l'AIE.

Les informations que les propriétaires doivent recevoir avant d'échantillonner

Avant de prélever l'échantillon de sang, informez le propriétaire,

  • des conséquences d'un résultat final positif (pour plus d'informations, consultez AIE – À quoi vous attendre si vos animaux sont potentiellement infectés)
  • qu'un échantillon avec un résultat de dépistage non négatif nécessitera des tests supplémentaires au Laboratoire national de référence EIA (NRL) de l'ACIA et que la publication des résultats finaux peut prendre jusqu'à 10 jours à compter de la soumission initiale
  • de ne pas déplacer l'équin des lieux actuels tant que les résultats finaux n'ont pas été communiqués
  • que leurs renseignements personnels sont recueillis par l'ACIA en vertu de la Loi sur la santé animale dans le but de soutenir le contrôle de l'AIE au Canada
  • qu'il existe un consentement implicite pour partager leurs informations personnelles avec des tiers approuvés lors de la demande de tests
  • que leurs renseignements personnels seront protégés en vertu des dispositions de la Loi sur la protection de la vie privée et seront stockés dans la Banque d'informations personnelles CFIA PPU 050/CFIA CON 025

Épreuves effectuées dans le cadre des activités nationales et d'exportation vers les États-Unis et le Mexique

l'ACIA pour le dépistage l'AIE qui sont cités dans le Module 3.6. Des épreuves peuvent être requises dans les cas suivants :

  • animaux destinés à l'exportation vers les États-Unis et le Mexique;
  • pour satisfaire aux exigences sanitaires nationales fixées par l'industrie (par exemple, présence dans un hippodrome, participation à des spectacles ou des foires, dans une écurie, lors de ventes);
  • dans le cadre du plan de biosécurité d'un propriétaire ou d'une écurie (par exemple dans le cas de l'introduction de nouveaux animaux);
  • dans les cas où l'on soupçonne la présence de la maladie.

Remarque :  Il est impératif d'utiliser de bonnes pratiques de biosécurité lors de l'échantillonnage afin de prévenir le transfert de sang d'un équidé à un autre ou à son échantillon. Les directives suivantes doivent être suivies lors de l'examen des équidés ou de l'obtention d'échantillons :

  • porter des gants propres en tout temps et changer les gants entre chaque animal;
  • prélever en premier les échantillons sur ceux dont l'infection par l'AIE est présumée négative ou soupçonnée d'être négative;
  • prélever en dernier les échantillons sur les équidés soupçonnés d'être infectés par l'AIE;
  • s'assurer que tout l'équipement servant au prélèvement d'échantillons de sang est à usage unique seulement et est détruit et éliminé de façon appropriée.

Envoi des échantillons

Les laboratoires approuvés par l'ACIA n'accepteront que les envois accompagnés d'un document de soumission (papier ou numérique) approuvé par l'ACIA, dûment rempli et exact. Voir les sections suivantes pour les détails sur les méthodes de soumission approuvées de documents papier et numériques.

Une fois prélevés, les échantillons sont conservés au réfrigérateur et expédiés sans délai au laboratoire. Utilisez les moyens d'expédition les plus sûrs et les plus rapides disponibles. N'envoyez les échantillons que pendant la semaine pour éviter qu'ils ne soient retardés pendant le transport ou retenus au laboratoire pendant les fins de semaine ou les jours fériés.

Si l'envoi est retardé, les échantillons peuvent être congelés et envoyés plus tard si les conditions suivantes sont remplies :

  • les échantillons de sérum sont congelés dans les 5 jours suivant la date de prélèvement.
  • les échantillons sont maintenus à une température de –15 °C ou inférieure jusqu'à leur envoi.
  • les cycles de congélation/décongélation doivent être évités; il ne faut donc pas placer les échantillons dans la porte du congélateur.
  • les échantillons doivent être envoyés au laboratoire afin que l'analyse puisse être effectuée dans les 3 semaines suivant la date du prélèvement.

Remarque : un résultat de test de dépistage ne sera valide que si l'analyse est effectuée dans les 3 semaines suivant la date de prélèvement. Les laboratoires approuvés ne doivent pas analyser des échantillons qui ne respectent pas ce délai.

Soumission

Les vétérinaires accrédités (VA) doivent utiliser un système numérique de certification de tests pour l'AIE approuvé par l'ACIA pour soumettre des échantillons et créer des certificats de test pour l'AIE. Notez que des formulaires de soumission papier pour les tests EIA sont disponibles, cependant, leur utilisation est limitée comme décrit dans le formulaire papier CFIA/ACIA 3937.

Système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA :

Le système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA est disponible dans les 2 langues officielles, bien que la page d'accueil principale ne soit disponible qu'en anglais. Une fois inscrit pour utiliser le système (des frais s'appliquent), vous recevrez un nom d'utilisateur, un mot de passe et un lien vers la page d'ouverture de session. La langue du navigateur de l'utilisateur sera détectée par le système et déterminera la langue d'affichage sur la plate-forme canadienne. La page d'ouverture de session est également accessible à partir du bouton connexion de la page d'accueil principale.

Pour utiliser un système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA, le vétérinaire accrédité doit :

  • s'inscrire auprès du fournisseur de services numériques et recevoir la formation nécessaire (pour les coordonnées du fournisseur de systèmes de certification, veuillez consulter le lien ci-dessus de la liste des systèmes de certification AIE numériques approuvés par l'ACIA
  • envoyer des échantillons à un laboratoire approuvé par l'ACIA, enregistré auprès du même fournisseur (voir Module 3.6)

Les champs de données du système numérique sont basés sur ceux du formulaire CFIA/ACIA 3937 et les exigences d'information suivantes s'appliquent aux deux :

renseignements sur le propriétaire : inscrire le nom légal de la personne, de l'entreprise ou de l'organisation, ainsi que toutes les coordonnées.

localisation de l'animal : inscrire la description officielle précise de l'endroit où se trouve l'équidé au moment du prélèvement de l'échantillon, ainsi que le bureau de district desservant cet endroit.

motif de l'épreuve : ne cochez qu'une seule case pour indiquer la raison pour laquelle le test est demandé. S'il y en a plusieurs qui s'appliquent, choisissez celle qui est la plus appropriée au moment de la prise d'échantillon.

Description du cheval :

  • remplissez tous les champs de façon aussi complète que possible.
    • utiliser la section 2.2 Identification des chevaux comme référence;
    • la description doit correspondre au cheval;
    • si la description n'est pas considérée exacte, le formulaire peut être refusé en tant que document de support officiel.
    • date de naissance – AAAA-MM-JJ ou, si la date exacte n'est pas connue, utiliser par défaut le 1 janvier de l'année de naissance.
    • Remarque : si une date de naissance plus précise est déterminée ultérieurement ou si la description change (par exemple, nouvelle cicatrice, changement de pelage), les champs correspondants peuvent être mis à jour dans le profil de l'animal sur la plateforme numérique, cependant, soyez conscient de toute incohérence entre le certificat de test AIE et tout certificat d'exportation valide.
  • si l'animal sur lequel un échantillon a été prélevé est un équidé autre qu'un cheval (c'est-à-dire, un âne, une mule, un zèbre ou un croisement), l'indiquer dans le champ « race ».
  • si disponibles, les données suivantes doivent être indiquées :
    • numéro d'enregistrement : saisir le numéro d'enregistrement de la race;
    • tatouage et marques : suffisamment explicites;
    • méthode d'identification : inscrire le moyen d'identification (par exemple micropuce, lecture de l'iris);
    • numéro d'identification : inscrire le numéro d'identification associé à la méthode d'identification.

Information sur l'envoyeur : inscrire le code de l'envoyeur (numéro d'accréditation), le nom et la signature de l'envoyeur, la date du prélèvement de l'échantillon, ainsi que les coordonnées de l'envoyeur.

Si une soumission numérique est créée et qu'une erreur est constatée avant que le laboratoire approuvé ne termine les tests, un vétérinaire accrédité peut demander au laboratoire approuvé de rejeter la soumission incorrecte.

  • veuillez communiquer avec le laboratoire approuvé pour confirmer les détails de ce processus.

Si une erreur est constatée après que l'échantillon a été testé, le vétérinaire accrédité peut, à la demande du propriétaire, procéder à un nouveau prélèvement d'échantillon sur l'équidé et effectuer une nouvelle soumission.

Photographies numériques

S'assurer que les photographies numériques sont de bonne qualité, en prenant en considération les conditions d'éclairage, la propreté, la résolution de l'image, le positionnement de l'équidé et l'absence d'objets pouvant masquer l'animal (par exemple : la selle, une couverture, les structures)

Le seul animal qui doit être visible sur la photo est celui qui fait l'objet du test. Les seules exceptions à cette règle sont si d'autres animaux sont partiellement visibles à l'arrière-plan ou si un poulain est avec sa jument. Dans ce dernier cas, l'animal qui fait l'objet du test ne doit pas cacher l'autre animal. Tous les efforts doivent être fournis pour exclure de la photo les personnes qui fournissent de l'assistance.

Il incombe au vétérinaire accrédité de s'assurer que les photographies du profil numérique de l'équidé sont représentatives de l'apparence de l'animal au moment du prélèvement d'échantillon. Si des changements importants sont intervenus depuis la prise des photos initiales, de nouvelles photos sont nécessaires et le texte de la description physique sera modifié pour refléter les changements. Il peut s'agir de marques nouvellement acquises incluant les telles que des marques, des cicatrices ou de changements de la couleur liés à l'âge.

Il est généralement possible d'obtenir des photos de bonne qualité, même si cela est parfois difficile en raison du tempérament de l'animal ou des conditions de l'environnement. Il est recommandé, lorsqu'on sait que des photographies doivent être prises lors d'un prochain rendez-vous, que le personnel de la clinique vétérinaire informe les clients de la nécessité de faire nettoyer l'animal de manière adéquate afin que ses marques soient visibles, comme l'exige le formulaire papier actuel et de placer l'animal dans un endroit suffisamment éclairé. Si l'on sait que l'équidé ne permettra pas de prendre de bonnes photos lors du rendez-vous, il est possible de demander au propriétaire de les prendre lui-même, de les envoyer à la clinique vétérinaire et de demander à la clinique de les télécharger sur la plate-forme numérique. Les photos doivent être conformes aux exigences citées par la suite et le vétérinaire accrédité doit être en mesure de confirmer que les photos soumises correspondent à l'animal qui fait l'objet du prélèvement d'échantillon.

Un certificat numérique de test pour l'AIE peut être refusé par un inspecteur si la qualité des photographies est inadéquate. Au besoin, communiquer avec le fournisseur de services numériques pour obtenir des conseils sur la manière de prendre les meilleures photos.

Veuillez noter que toutes les marques blanches doivent être visibles sur les photographies numériques et que la longueur totale de tous les membres doit apparaître sur les photographies. Dans le cas des photographies frontales, si les seules marques sont sur la tête, la photographie peut être limitée à la tête. S'il y a des marques blanches sur les membres antérieurs, ces derniers doivent figurer sur la photographie et ce, sur toute leur longueur. Tous les champs de description du formulaire doivent être remplis. Veuillez indiquer « S.O. » pour sans objet ou « aucun » lorsque nécessaire. Si un système de soumission numérique est utilisé pour les équidés ayant de nombreuses marques détaillées (par exemple, Appaloosas), les descriptions écrites des marques blanches ne sont pas requises et « S.O. » peut être inscrit dans les champs de description du formulaire.

Les vétérinaires accrédités sont responsables de la sécurité et de l'utilisation appropriée de leur signature électronique et doivent prendre les précautions nécessaires pour empêcher son utilisation abusive. Seuls les vétérinaires accrédités sont autorisés à signer des documents en utilisant leur signature électronique protégée par un mot de passe. Les autres membres du personnel à la clinique ne sont pas autorisés de participer au processus de signature. L'utilisation de votre signature numérique par une personne autre que vous-même serait considérée comme un manquement important à votre entente d'accréditation et entraîne l'annulation du document. Veuillez noter que les dispositions de l'article 10 de l'Entente d'accréditation des vétérinaires s'appliquent également à la soumission numérique de documents au moyen d'un système numérique.

Les certificats numériques finaux de test pour l'AIE sont reconnus comme des résultats officiels de test de dépistage de l'AIE s'ils sont générés à l'aide d'un système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA. Les copies imprimées en noir et blanc ou en couleur du certificat électronique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA sont acceptables et peuvent être utilisées pour usage domestique au Canada ou comme preuve de résultat négatif au test de dépistage de l'AIE à des fins d'exportation.

Rapport sur les résultats (système numérique)

Pour un résultat négatif au test de dépistage de l'AIE, le certificat numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA peut être consulté en ligne en temps réel par le propriétaire (facultatif), le vétérinaire accrédité, le laboratoire approuvé par l'ACIA et nous.

Pour un résultat non négatif au test de dépistage de l'AIE, le système génère un certificat numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA, filigrané avec le mot « inconclusive ». Le propriétaire de l'équidé n'aura pas accès au certificat numérique de test non concluant sur le système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA. Le vétérinaire accrédité qui soumet le test aura accès au certificat numérique de test non concluant, mais il ne doit pas en fournir une copie au client ni communiquer le résultat au propriétaire avant que le test de confirmation de l'AIE du LNR ne soit complété. Si les résultats sont confirmés comme étant positifs pour l'AIE, le bureau de district de l'ACIA communiquera avec le vétérinaire accrédité et le propriétaire de l'animal pour les informer des prochaines étapes. Si les résultats sont confirmés négatifs, le bureau de district de l'ACIA transmettra les résultats au vétérinaire accrédité qui fera parvenir les documents des résultats négatifs au propriétaire.

Remarque concernant les résultats non négatifs lors d'épreuves de dépistage : un échantillon dont le résultat du test de dépistage est non négatif sera automatiquement transmis au LNR par le laboratoire approuvé par l'ACIA pour le dépistage l'AIE afin qu'une épreuve de confirmation soit effectuée. L'équidé est considéré comme un cas suspect dans l'attente de l'épreuve de confirmation et ne doit pas être testé à nouveau par un vétérinaire accrédité en attendant les résultats finaux de l'épreuve.

Annulation des certificats

Si une erreur est identifiée après la délivrance d'un certificat, un nouvel échantillon et un nouveau formulaire de soumission seront requis. Cela peut se produire lorsqu'une erreur dans le certificat est identifiée par le laboratoire approuvé par l'ACIA, le vétérinaire de district, le VA ou le propriétaire du cheval.

Si cela se produit, le VA devrait :

  • accéder à la plateforme en ligne et annuler le certificat numérique erroné du système, en suivant les instructions fournies par le fournisseur de services.
    • la raison de l'annulation du certificat devrait être inscrite dans le champ prévu à cet effet.
  • informer le propriétaire du cheval de détruire toutes les copies papier existantes du certificat annulé
  • informer le vétérinaire de district des mesures prises, ainsi que du numéro de laboratoire (c'est-à-dire : le numéro d'accès) du certificat annulé

Version papier du formulaire CFIA/ACIA 3937 – Soumission d'échantillons et communication des résultats

Des formulaires papier de soumission existent toujours pour les tests AIE, cependant, leur utilisation est limitée aux exceptions suivantes :

  1. le vétérinaire accrédité (VA) soumet des échantillons au nom d'une clinique vétérinaire à laquelle s'appliquent tous les éléments suivants :
    • 10 échantillons ou moins sont soumis pour des épreuves d'AIE par année civile.
    • la clinique vétérinaire s'est préalablement identifiée auprès de l'ACIA comme une clinique effectuant un faible volume de tests en soumettant un formulaire de demande d'exemption numérique (disponible annuellement durant le mois de novembre).
    • la clinique vétérinaire est approuvée et reste en règle pour obtenir une exemption numérique et n'a pas reçu de communications de notre part indiquant le contraire.
  2. la clinique vétérinaire du VA est inscrite au système de certification numérique de test pour l'AIE approuvé par l'ACIA, mais le VA est obligé d'utiliser un formulaire de soumission papier en raison de circonstances indépendantes de sa volonté.
    • par exemple, on observe un dysfonctionnement technique du système numérique et il est impossible de terminer la soumission de l'échantillon ou lorsque la saisie de photographies numériques n'est pas possible. C'est ce qu'on appelle l'utilisation d'urgence. S'il est prévu qu'une clinique dépasse 10 soumissions d'utilisation d'urgence au cours d'une année civile, contactez d'abord le bureau de votre district de santé animale local. À défaut, la clinique sera désignée comme non approuvée pour l'utilisation du formulaire de soumission papier.

Si l'un ou l'autre des points (1) ou (2) s'applique, un VA est autorisé à soumettre des échantillons à analyser en utilisant le formulaire papier CFIA/ACIA 3937 – Anémie infectieuse des équidés (AIE) – Rapport et certificat d'épreuve sérologique.

De plus, le formulaire papier CFIA/ACIA 4679 – Anémie infectieuse des équidés (AIE) – Rapport et certificat domestique d'épreuve sérologique pour plusieurs équidés n'est plus acceptée.

Processus de demande d'exemption numérique

Les cliniques doivent demander une exemption d'utilisation du système de certification numérique comme décrit ci-dessous:

  • la période de demande d'exemption s'étend du 1er au 30 novembre de chaque année civile
  • une clinique n'est tenue de faire la demande d'exemption numérique qu'une SEULE fois (et non annuellement) – une nouvelle demande ne serait nécessaire que si l'information de la pratique change significativement (par exemple, nouveau nom de pratique, nouvel emplacement, nouveau propriétaire)
  • les cliniques qui ont demandé une exemption numérique ne recevront pas de réponse de l'ACIA. Les exceptions à cela seraient si nous exigeons des informations supplémentaires, des clarifications ou s'il est déterminé, lors de l'examen des données de laboratoire de l'année civile précédente, que la pratique ne répond pas aux critères d'exemption. Par conséquent, sauf indication contraire, un demandeur est approuvé pour l'exemption numérique.
  • toute clinique (non un vétérinaire accrédité individuellement) qui dépassera 10 soumissions d'articles au cours de l'année doit suivre les instructions de ce module pour commencer à utiliser le système de certification numérique EIA. Ces pratiques seront désignées comme non approuvées
    • toute clinique désignée comme non approuvée (par exemple, dépassant 10 soumissions papier au cours d'une année civile ou ne présentant pas de demande d'exemption numérique à la suite d'un rappel/d'une demande de notre part) ne pourra pas soumettre le formulaire papier aux laboratoires approuvés, ce qui entrainera le rejet de la soumission par le laboratoire.
    • l'ACIA contactera par courrier électronique toutes les cliniques désignées comme non approuvées avant de révoquer la capacité de la clinique à utiliser le formulaire papier
  • pour toute question ou pour obtenir des copies du formulaire CFIA/ACIA 3937, communiquer avec le bureau local de votre district de santé animale.

Tous les champs du formulaire CFIA/ACIA 3937 doivent être remplis au complet, sauf si l'information n'existe pas; rayez tous les champs non utilisés. Veuillez-vous reporter à la section de soumission au moyen du système numérique ci-dessus pour une description des renseignements requis.

Les 3 premières copies (la blanche [1], la jaune clair [2] et la rose [3]) du formulaire CFIA/ACIA 3937 doivent être envoyées au laboratoire approuvé par l'ACIA avec l'échantillon de sang. L'envoyeur (vétérinaire accrédité) garde la quatrième copie (jaune foncé [4]). Les résultats ne doivent pas être inscrits sur cette copie, qui ne pourra pas non plus servir de duplicata.

Rapport sur les résultats (Formulaire papier CFIA/ACIA 3937)

Si le résultat du test de dépistage de l'AIE se révèle négatif au laboratoire approuvé par l'ACIA, le résultat sera consigné sur le formulaire et signé par une personne autorisée. La copie 1 (blanche) du formulaire sera retournée à l'envoyeur (vétérinaire accrédité). La copie 2 (jaune clair) sera envoyée par le laboratoire approuvé par l'ACIA au bureau de district qui dessert l'endroit où l'échantillon a été prélevé. Les résultats des tests ne seront pas communiqués par téléphone par le laboratoire approuvé par l'ACIA. Exceptionnellement, le vétérinaire accrédité peut demander au laboratoire d'envoyer une copie du certificat original par télécopieur ou par courriel au bureau de district avant que celui-ci ne reçoive la copie par courrier.

En aucun cas, un vétérinaire accrédité ou un laboratoire approuvé par l'ACIA ne doit apporter de modifications au formulaire une fois que les résultats de laboratoire y ont été consignés. Si une erreur est constatée, par exemple si la description de l'animal n'est pas exacte ou si des informations requises sont manquantes, le vétérinaire accrédité peut, à la demande du propriétaire, prélever à nouveau un échantillon de l'équidé aux fins d'analyse de dépistage et soumettre un nouveau formulaire de soumission. Le fait de ne pas tester à nouveau et de soumettre à nouveau un formulaire précis/complet peut entraîner le rejet du formulaire par un vétérinaire de l'ACIA en tant que pièce justificative officielle.

Dans le cas d'un résultat non négatif de test de dépistage de l'AIE au laboratoire approuvé par l'ACIA, le bureau de district qui dessert l'endroit où le prélèvement de l'échantillon a eu lieu sera informé du résultat dans les 24 heures par le laboratoire. La copie 1 (blanche) et la copie 2 (jaune clair) du formulaire seront envoyées par courrier au bureau de district. L'échantillon de sérum sera envoyé au LNR où des tests de confirmation seront effectués.

Résultats non négatifs lors d'épreuves de dépistage

Un échantillon dont le résultat du test de dépistage est non négatif sera automatiquement transmis au LNR par le laboratoire approuvé par nous pour le dépistage l'AIE afin qu'une épreuve de confirmation soit effectuée. L'équidé est considéré comme un cas suspect dans l'attente de l'épreuve de confirmation et ne doit pas être testé à nouveau par un vétérinaire accrédité en attendant les résultats finaux de l'épreuve.

Si les résultats de conformation sont négatifs, le vétérinaire de l'ACIA enverra au soumissionnaire original (vétérinaire accrédité) la copie 1 (blanche) du formulaire ainsi qu'une fiche d'information client (FIC) incluant les résultats des tests LNR.

Si les résultats de confirmation sont non négatifs (c'est-à-dire s'ils sont non concluants ou positifs), ils seront communiqués au VA et au propriétaire de l'équidé par un vétérinaire de l'ACIA.

3.2B – Tests sérologiques pour la brucellose

Dans cette section :

Consultez le module 8.2 de ce manuel pour des informations spécifiques à la maladie concernant la brucellose.

Informations que les propriétaires doivent recevoir avant l'échantillonage

Avant de prélever un échantillon pour le test de brucellose, informez le propriétaire de l'animal que :

  • un échantillon avec un résultat de dépistage non négatif nécessitera des tests supplémentaires (auxiliaires) par un laboratoire de l'ACIA
  • un résultat de test auxiliaire non négatif déclenchera une enquête sur la maladie dirigée par l'ACIA, qui pourra inclure :
    • une enquête épidémiologique,
    • contrôles de mouvement (c'est-à-dire la quarantaine)
    • des tests supplémentaires sur l'animal non négatif et/ou le bétail exposé, et
    • destruction possible de l'animal non négatif pour faciliter les tests tissulaires confirmatoires
  • des conséquences d'un cas confirmé positif de brucellose (voir fiche d'information sur la brucellose).

De plus, informez le propriétaire que :

  • Le Canada considère que sa population d'élevage domestique est exempte de brucellose
  • Les animaux ne devraient pas être déplacés des lieux actuels tant que les résultats finaux n'ont pas été communiqués
  • Les résultats négatifs des tests n'accordent aucune exemption aux exigences en vigueur des programmes de salubrité alimentaire, y compris celles pour le lait cru et non pasteurisé 
  • Il y a un consentement implicite pour partager leurs informations personnelles avec des tiers approuvés lors de la demande de tests
  • que leurs renseignements personnels seront protégés en vertu des dispositions de la Loi sur la protection de la vie privée et seront conservés dans la Banque d'informations personnelles CFIA PPU 050 / CFIA CON 025

pour plus d'informations concernant le programme de brucellose de l'ACIA, consultez la fiche d'information sur la brucellose ou communiquez avec le bureau de district local de l'ACIA

Motifs des tests de brucellose

Les vétérinaires accrédités peuvent soumettre des échantillons pour des tests de brucellose :

  • pour participer au programme d'insémination artificielle
  • pour satisfaire aux exigences de certification à l'exportation (par exemple, pour satisfaire aux exigences fédérales/étatiques de test des États-Unis ou du Mexique)
  • à la demande d'un propriétaire d'animal.

Ces échantillons sont envoyés soit à des laboratoires approuvés par l'ACIA (BPAT seulement), soit à des laboratoires de l'ACIA (pour FPA, ELISA ou BPAT), selon le motif du test, le type de test requis et/ou l'espèce testée.

Notez que si un vétérinaire accrédité soupçonne un cas de brucellose, il doit être signalé à un bureau de district de l'ACIA conformément à la Loi sur la santé des animaux

  • Les échantillons ne peuvent pas être soumis par des vétérinaires accrédités à des laboratoires approuvés si une brucellose est suspectée

Le bureau de district superviseur fournira des conseils sur la manière de procéder dans cette situation

Tests du programme d'insémination artificielle

Les vétérinaires accrédités peuvent soumettre des échantillons pour un test de brucellose à un laboratoire de l'ACIA afin de répondre aux exigences du Programme d'insémination artificielle.

Ces échantillons sont soumis à l'aide du formulaire CFIA/ACIA 5473 – Soumission d'échantillons d'importation, d'exportation et d'insémination artificielle pour la santé animale, qui peut être obtenu auprès de votre bureau de district local de l'ACIA.

Lorsque vous soumettez des échantillons de bovins dans l'installation d'isolement d'un centre de production de sperme, consultez la procédure spéciale à la section 3.4.

Pour des détails précis concernant les tests de brucellose requis dans le cadre du Programme d'insémination artificielle, consultez les sections pertinentes du module 10 de ce manuel.

Exportation d'animaux vivants vers les États-Unis et le Mexique

Lors de la détermination des exigences de test pour l'exportation d'animaux vivants, les vétérinaires accrédités doivent consulter le certificat d'exportation et/ou le permis d'importation applicable pour le type spécifique de test requis ainsi que le laboratoire d'analyse (laboratoire de l'ACIA versus laboratoire approuvé par l'ACIA).

  • les certificats d'exportation en vigueur sont disponibles auprès de votre bureau de district local

Les vétérinaires accrédités soumettront des échantillons pour le test de brucellose à un laboratoire approuvé par l'ACIA où le test d'agglutination sur plaque tamponné (BPAT) est requis (sauf indication contraire sur le certificat d'exportation).

Lorsque vous soumettez des échantillons à un laboratoire approuvé par l'ACIA, suivez les directives décrites ci-dessous :

  • un numéro de notification n'est pas requis sur le formulaire CFIA/ACIA 5473, mais la destination doit être identifiée comme « USA » ou « Mexique »
  • il est acceptable de remplir les deux premières pages du formulaire CFIA/ACIA 5473 en entier et de marquer la troisième page (Informations types) par « Voir la liste jointe »
    • La liste peut être un tableur qui enregistre l'identification, la description et les numéros de fioles correspondants
    • la liste doit indiquer le «numéro de référence du Formulaire 5473  20##IEAB-00000#####-4 » et être signée – le numéro de référence du formulaire est celui qui apparaît en bas au centre des 3 pages du formulaire CFIA/ACIA 5473 et doit commencer par l'année civile en cours

Lorsque des tests de brucellose autres que le BPAT doivent répondre aux exigences d'exportation (par exemple, le test de polarisation de fluorescence (FPA) ou le test d'immunoadsorption par enzyme liée(ELISA)) accrédités, les vétérinaires accrédités soumettront des échantillons pour test de brucellose à un laboratoire de l'ACIA (et/ou lorsqu'indiqué dans le certificat d'exportation applicable).

  • ces échantillons sont également soumis à l'aide du formulaire CFIA/ACIA 5473 – Soumission d'échantillons d'importation, d'exportation et d'insémination artificielle pour la santé animale, qui peut être obtenu auprès de votre bureau de district local de l'ACIA.
  • lors de la soumission d'échantillons à un laboratoire de l'ACIA (par exemple pour l'exportation vers le Mexique), se référer à la procédure spéciale de l'article 3.4.
Tests de brucellose demandés par le propriétaire

Les tests effectués à des fins autres que l'exportation ou le Programme d'insémination artificielle sont considérés comme des tests à la demande du propriétaire (par exemple, exigences provinciales ou liées à un déplacement national; exclut la surveillance/tests des animaux sauvages).

Les échantillons prélevés pour les tests demandés par le propriétaire sont envoyés à des laboratoires approuvés par l'ACIA pour le test d'agglutination sur plaque tamponné (BPAT).

Exigences de soumission :

Le vétérinaire accrédité est responsable des éléments suivants avant l'échantillonnage :

  • vérifier que le laboratoire approuvé peut :
    • tester l'espèce demandée
    • recevoir et analyser le nombre d'échantillons, et
    • respecter le calendrier requis
  • les échantillons doivent être soumis à un laboratoire approuvé par l'ACIA à l'aide du formulaire de soumission du laboratoire
  • sur le formulaire du laboratoire, indiquez l'emplacement du bureau de district de l'ACIA où l'animal ou les animaux échantillonnés se trouvent, ainsi que la raison du test (par exemple, sous le champ de commentaires ou d'historique) comme suit : « Le propriétaire demande un test sous le bureau de district de l'ACIA <insérer le nom > »
Espèces approuvées pour des tests dans des laboratoires approuvés par l'ACIA :

Les laboratoires approuvés par l'ACIA ne sont autorisés qu'à analyser des échantillons des espèces animales d'élevage ou domestiques suivantes :

  • Bovins (Bos taurus/indicus) et bisons d'Amérique (bison [Bos] bison)
  • Yak domestique (Bos grunniens) et buffle d'eau (Bubalus bubalis)
  • Moutons domestiques (Ovis aries) et chèvres domestiques (Capra hircus)
  • Cervidés d'élevage :
    • L'élan, le cerf rouge (y compris les hybrides) et le cerf Sika du genre Cervus
    • Cerf de Virginie et cerf mulet du genre Odocoileus
    • Renne / caribou (Rangifer tarandus)
    • Daim (Dama dama)
  • Porcs domestiques (Sus domesticus) et sanglier d'élevage (Sus scrofa)
  • Camélidés (famille des camélidés)

Pour les tests de brucellose d'espèces autres que celles mentionnées ci-dessus ou tout animal sauvage, le vétérinaire accrédité doit consulter son bureau local de district de l'ACIA afin de déterminer l'admissibilité au test et les procédures de soumission appropriées.

3.2C – Tests sérologiques pour la leucose bovine enzootique (LBE)

Échantillons LBE recueillis dans le cadre du programme canadien de certification sanitaire des troupeaux à l'égard de la leucose bovine enzootique (PCCST-LBE)

  • soumis à un laboratoire de l'ACIA, utilisez le formulaire CFIA/ACIA 3841 – Programme canadien de certification sanitaire des troupeaux – Rapport d'épreuve sérologique
    • utilisez le code de test BLV-ELI
  • un gabarit électronique pour la soumission des échantillons PCCST-LBE doit être utilisé au lieu de remplir le tableau d'information sur l'animal du formulaire ACIA 3841 (voir 3.4 « Procédure particulière pour las soumission dans un laboratoire de l'ACIA »)

3.3 - Épreuves pour la détection de la campylobactériose bovine et de la trichomonose

Ce module du manuel du vétérinaire accrédité fournit l'information suivante au sujet des épreuves de campylobactériose bovine et de trichomonose :

Objectifs

Selon l'article 2. du Règlement sur la santé des animaux, le terme « épreuve » comprend :

  • le prélèvement de tissus ou de liquides d'un animal (par exemple, du sérum, smegma préputéal)
  • une injection pratiquée sur un animal pour déterminer s'il est atteint d'une maladie (par exemple, épreuve à la tuberculine)

La méthode de prélèvement décrite dans ce module peut servir à soumettre des échantillons pour l'exportation (par exemple, pour qualifier des bovins pour exportation au Mexique lorsque requis) ou pour rencontrer les exigences du programme national d'insémination artificielle et le programme d'agrément pour l'exportation des embryons.  Les tests respectant les exigences de l'État (c'est-à-dire non fédérales) ou tout autre test demandé par le propriétaire ne relève pas du cadre du programme VA et doivent être effectués dans des laboratoires autres que ceux de l'ACIA et pouvant fournir des milieux de culture et offrir les tests.

Information générale

Tritrichomonas foetus (aussi nommé Trichomonas foetus ou T. foetus) est un parasite protozoaire flagellé qui vit dans le tractus reproducteur des bovins. Il est uniquement transmis par contact vénérien. Les taureaux infectés ont tendance à devenir porteur à vie et servent de réservoir principal de la maladie. Dans le tractus reproductif du taureau, l'organisme se cache communément au niveau des cryptes de la muqueuse pénienne ou préputiale. Tritrichomonas foetus est parfois peu abondant et inégalement distribué dans la cavité préputiale des taureaux infectés.

On pense que la concentration est plus élevée au niveau du gland du pénis. Les vaches qui deviennent infectées peuvent présenter de la mortalité embryonnaire, un avortement spontané, ou souffrir de pyométrite. Certaines vaches demeurent infectées pendant une gestation complète et peuvent transmettre l'infection au début de la saison de reproduction suivante. Même si la prévalence du phénomène des mères porteuses est inconnue, on pense qu'elle est faible.

Campylobacter fetus comprend 2 sous-espèces :

  • C. fetus subsp. venerealis
  • C. fetus subsp. fetus

Par définition, C. fetus subsp. venerealis est l'agent causal de la campylobactériose génitale bovine, une maladie transmise sexuellement caractérisée par de l'infertilité, une mortalité embryonnaire précoce et de l'avortement. Cette maladie cause des pertes économiques considérables dans les régions où elle est endémique. Même si des infections chez le bovin peuvent aussi être causées par C. fetus subsp. fetus, cet organisme ne cause habituellement que des avortements sporadiques. C. fetus subsp. venerealis est l'organisme d'intérêt pour le programme national d'insémination artificielle, le programme d'agrément pour l'exportation des embryons et la certification à l'exportation de bovins pour le Mexique.

Matériel et fourniture

Les coûts reliés au matériel de prélèvement, d'emballage et d'expédition pour l'envoi des échantillons sont à la charge du vétérinaire accrédité.

Matériel requis:

  • gants jetables
  • ciseau
  • pipette pour infusion ou insémination artificielle de 53 cm (jusqu'à 68 cm pour les gros taureaux) emballée individuellement
  • seringue 20 ml jetable
  • seringue 3 ml jetable avec aiguille fine (pas plus de 20 gauge)
  • milieu de prélèvement et transport pour chaque organisme

Remarque concernant les exigences du milieu de transport : Chaque organisme (Campylobacter et Trichomonas) a des exigences spécifiques de milieu de transport. Présentement, le milieu de collecte et celui de transport sont fournis gracieusement par le laboratoire. Cependant, les frais d'expédition de ces milieux du laboratoire vers le client sont aux frais du client (vétérinaire accrédité ou centre d'insémination artificielle). Un numéro de compte de service de messagerie sera requis lors de la commande de matériel au laboratoire.

  • Campylobacter : les fioles de milieu de transport enrichi (MTE) et de saline sont commandées auprès du notre laboratoire de microbiologie et santé animale à Ottawa (Fallowfield)
    • un formulaire de commande spécifique est disponible à notre bureau de district
    • le formulaire complété doit être envoyé par courriel au laboratoire (avant la date limite hebdomadaire indiquée sur le formulaire)
    • les fioles de MTE et celles de saline sont expédiées ensemble dans un contenant de mousse de polystyrène inséré dans un manchon de carton ondulé, qui est placé dans une boîte de mousse de polystyrène de plus grande dimension contenant des blocs réfrigérants
    • les fioles ne sont pas expédiées les vendredis
    • si les fioles de MTE devaient se réchauffer durant le transport, ceci ne compromettrait pas leur utilisation ultérieure

    Toutefois, dès réception, les fioles de MTE et celles de saline doivent être entreposés à 4 °C jusqu'à leur utilisation

    • le contenant de mousse contient 10 fioles de MTE et 5 ou 6 de saline
      • 2 fioles de MTE sont requises pour chaque animal testé
      • le manchon extérieur de chaque contenant de mousse maintient le tout ensemble
      • des flèches rouges indiquent la position verticale des fioles
      • retirez le manchon de carton pour libérer le contenant de mousse (le dessus de chaque contenant de mousse est identifié en anglais et en français)
    • retirez le dessus du contenant pour accéder aux fioles de MTE et de saline
    • vérifier qu'il y a bien une étiquette (fixée sur chacune des fioles) et une date d'expiration (écrite sur l'étiquette)
      • toutes les fioles de MTE doivent avoir une étiquette et être inoculées au plus tard à la date d'expiration mentionnée pour être acceptées pour culture
    • les fioles de MTE ont une durée de conservation de 90 jours après la date de production
  • milieu de transport pour Trichomonas foetus (TFTM) : le milieu de transport provient du Centre de parasitologie alimentaire et animale de notre laboratoire  à Saskatoon
    • un formulaire de commande spécifique est disponible auprès de notre bureau de district.
    • le formulaire complété doit être envoyé par courriel au laboratoire (avant la date limite hebdomadaire indiquée sur le formulaire) pour la commande de milieux.
    • ce milieu de transport doit aussi être entreposé à 4 °C dès sa réception, jusqu'à son utilisation
      • sa durée de conservation est de 14 jours suivant sa date de production
    • le milieu peut être inoculé jusqu'à la date d'expiration inclusivement

Remarque sur la commande de milieux de transport : communiquez avec notre bureau de district bien à l'avance de tout échantillonnage planifié. Bien que les commandes puissent généralement être expédiées au demandeur dans les 5 jours suivant la réception de la demande, l'état de l'inventaire actuel (par exemple, date d'expiration imminente) ou les commandes de quantités importantes peuvent nécessiter la production d'un nouveau lot de milieux, ce qui peut prendre jusqu'à 6 semaines.

Échantillonnage

Une bonne technique de prélèvement et de la minutie lors de l'entreposage et de l'envoi sont déterminants pour obtenir une sensibilité optimale du test diagnostique. Une vidéo produite par notre laboratoire à Saskatoon est disponible à notre bureau de district pour visualiser la technique de prélèvement pour Tritrichomonas.

Les dates d'échantillonnage doivent être choisies en tenant compte du temps d'expédition au laboratoire.

Les échantillons doivent arriver au laboratoire au plus tard le jeudi et ne doivent pas être expédiés pendant la fin de semaine, car ils doivent être reçus par le laboratoire dans un certain délai suite à l'inoculation du milieu (48 heures pour Campylobacter ; 5 jours pour Tritrichomonas).
Lors de l'échantillonnage, tous les milieux de transport (MTE et TFTM) la saline doivent être amenés à une température ambiante de 18 à 37 °C avant leur inoculation.

  • la date d'expiration du milieu de transport doit être vérifiée avant de débuter la prise d'échantillon
  • 2 échantillons distincts doivent être prélevés si le dépistage pour les 2 organismes est requis
  • la contention de l'animal est requise pour éviter des blessures à celui-ci ainsi qu'à la personne qui effectue la collecte
  • du matériel de prélèvement distinct doit être utilisé pour chaque animal

Animaux mâles:

  • un échantillon de liquide préputial (smegma) est prélevé.
  • l'échantillonnage ne peut être effectué que 7 jours après un service naturel ou la récolte de sperme à l'aide d'un vagin artificiel
  • l'utilisation de nouveaux gants jetables est requise entre chaque animal
  • les longs poils et les amas de fèces à l'entrée du fourreau doivent être coupés à l'aide de ciseaux pour diminuer la contamination
    • on doit prendre soin de désinfecter puis rincer les ciseaux entre chaque animal
    • il n'est pas conseillé de laver le prépuce, puisque le lavage peut introduire des contaminants et/ou rincer et éliminer les organismes ciblés
    • tout désinfectant doit être évité.
      • Si la région préputiale est excessivement sale, un nettoyage minutieux à l'eau de la partie externe seulement peut être effectué, suivi d'un assèchement à l'aide de serviette de papier
  • insérer la pipette dans le fourreau jusqu'à la moitié de la gaine préputiale
  • connecter une seringue de 20 ml et appliquer une pression négative.
    • maintenir la pipette parallèle au fourreau
    • si on est inquiet d'introduire des contaminants lors du passage de l'orifice préputial, la gaine de plastique qui recouvre la pipette peut demeurer en place jusqu'à ce que la partie la plus contaminée à l'entrée du fourreau soit dépassée
  • avancer la pipette jusqu'au fornix
  • à l'aide de mouvement de va-et-vient allant du fornix jusqu'à 5 cm de l'entrée du fourreau, glisser la pipette 10 à 15 fois pour effectuer un délicat grattage de la muqueuse préputiale
    • il est important que la pipette entre en contact avec le gland du pénis
  • le grattage sera recueilli grâce à la pression négative dans la pipette
  • retirer la pipette et la seringue du prépuce

Animaux femelles:

  • le mucus cervical ou des écoulements vaginaux doivent être prélevés
  • utiliser une paire de gants jetables distincts entre chaque animal
  •  la vulve externe est nettoyée de ses débris à l'aide de serviettes en papier légèrement mouillées  
    • éviter l'utilisation de désinfectant
  • immobiliser le col par palpation transrectale et introduire la pipette dans le tiers antérieur du vagin
  • avancer la pipette jusqu'au col.
    • Une pression négative est appliquée à l'aide de la seringue pour prélever du mucus cervical
    • des sécrétions vaginales peuvent aussi être collectées dans le vagin antérieur
  • une fois le matériel prélevé, retirer la seringue et la pipette de la vulve

Préparation de l'échantillon et emballage

La fiabilité d'une épreuve diagnostique est directement liée à la nature des spécimens ou aux échantillons reçus et à leur état. Il est très important de bien identifier les animaux et de fournir des renseignements complets et exacts sur les formulaires.

Chaque fiole doit porter une inscription à l'encre indélébile, correspondant au numéro inscrit sous la colonne nombre d'ampoule du formulaire de soumission attribué à l'animal échantillonné.

Pour l'analyse de Campylobacter, 2 fioles doivent être identifiées avec le même numéro d'échantillon suivi par un suffixe A ou B correspondant à l'animal testé

Tritrichomonas :

  • identifier correctement les fioles de TFTM (étiqueter le tube actuelle avec l'identificateur, pas seulement le couvercle)
  • expulser tout le matériel récolté dans la fiole
    • Aspirer doucement du milieu de transport dans la pipette et rincer à répétition tout contenu résiduel de la seringue et de la pipette dans le milieu de transport
  • remettre les fioles de TFTM contenant les échantillons dans leur contenant isolé ayant servi à leur envoi par le laboratoire
  • les spécimens inoculés doivent être emballés pour prévenir l'exposition à la lumière et minimiser les variations de température
    • pour prévenir les variations de température pendant l'expédition, les échantillons mis dans un contenant isolé seront emballés à l'aide de papier journal ou de tout autre matériel isolant pour combler les espaces vides
  • les échantillons doivent être conservés entre 10 à 37 °C.
    • Si les échantillons sont conservés et expédiés à 4 °C ou moins, la viabilité des organismes diminue et la sensibilité du test diminuera
    • l'utilisation de contenant isolé est essentielle
    • les échantillons gelés ou expédiés sur la glace ne donneront pas de résultats fiables et de nouveaux échantillons seront requis
    • lors des mois d'été, des précautions doivent être prises pour éviter que les échantillons soient exposés à des températures excédant 37 °C.
      • n'ajoutez pas de blocs réfrigérants, car cela fera chuter la température des échantillons en dessous de 10 °C
    • lors des mois d'hiver, des blocs/sacs de gel peuvent être réchauffés à un maximum de 37 °C et être ajoutés à l'envoi pour maintenir les échantillons au-dessus de 10 °C. 
      • ne placez pas ces matériaux en contact direct avec les échantillons et précisez sur le formulaire de demande que ces blocs/sacs de gel supplémentaires n'ont pas été congelés, mais inclus dans l'emballage à la température ambiante ou en dessous de la température maximale indiquée ci-dessus
    • les échantillons doivent parvenir au laboratoire de Saskatoon dans les 5 jours de la collecte, sinon ils seront déclarés impropres et ne seront pas analysés

Campylobacter : Pour chaque animal échantillonné,

  • identifier correctement 2 fioles de MTE avec le numéro d'échantillon et le suffixe (une fiole identifiée avec le suffixe A la seconde avec le suffixe B) en utilisant l'espace d'identification située sur le côté des fioles; et
  • identifier 1 fiole de saline
  • ouvrez la fiole de saline
  • recueillir un échantillon de liquide préputial tel que décrit plus haut
  • immerger l'extrémité de la pipette dans la saline et y transférer l'échantillon
  • expulser le matériel résiduel en aspirant de la saline et en rinçant délicatement à plusieurs reprises à l'aide du piston
    • l'échantillon ne doit pas demeurer dans la saline plus de 15 minutes avant le transfert et l'inoculation dans les fioles de MTE
  • utiliser une seringue stérile jetable de 3 ml et une aiguille fine (au plus 20 gauge) et aspirer délicatement 2 ml de la couche supérieure de saline
    • évacuer tout l'air de la seringue avant le transfert
  • injecter 1 ml de saline aspirée à travers la membrane de caoutchouc dans la fiole de MTE identifiée avec le suffixe A (NE PAS dévisser la membrane de caoutchouc puisque cela aurait pour effet de modifier la composition du mélange gazeux qu'elle contient)
  • répéter l'opération pour la deuxième fiole de MTE identifiée avec le suffixe B, en utilisant le 1 ml de la saline restant dans la seringue
    • mélangez le contenu en agitant délicatement les fioles de MTE
  • replacer les fioles de MTE et celles de saline usagées dans la partie inférieure du contenant de mousse d'où elles avaient été retirées
    • quand le contenant de mousse est rempli de fioles de MTE et de saline, replacez le couvercle du contenant et glisser le manchon de carton ondulé par-dessus, avec les flèches rouges pointant vers le haut
    • ne pas couper, marquer ou altérer les contenants de mousse ni les manchons de carton
  • placer le contenant de mousse dans une autre boîte de mousse de polystyrène plus grande sans bloc réfrigérant et retourner le tout à notre laboratoire à Ottawa (Fallowfield) sans délai
    • la température pendant le transport devrait se situer entre 18 à 37 °C
    • l'utilisation de blocs/sacs de gel réchauffés devrait être envisagée pendant les mois les plus froids, tel que décrit ci-dessus pour Tritrichomonas
  • utiliser le mode de transport disponible qui est le plus rapide et sécuritaire, et envoyer les échantillons en semaine seulement pour éviter qu'ils soient retenus en transit ou mis en attente au laboratoire pendant les fins de semaine ou lors de journées fériées
    • les fioles de MTE doivent parvenir au laboratoire de diagnostic dans les 48 heures suivant leur inoculation
    • les échantillons qui arrivent au laboratoire après ce délai seront déclarés impropres à être analysés
  • les échantillons doivent être protégés contre les températures extrêmes pendant leur transport
    • chaque facteur influençant la viabilité de l'organisme recherché affectera la sensibilité du test effectué, compromettant la fiabilité du résultat d'analyse
    • si les échantillons arrivent au laboratoire froids ou congelés, ils seront déclarés impropres et ne seront pas analysés

Formulaires de soumission

Les échantillons doivent être soumis à l'aide du formulaire CFIA/ACIA 5473 et du gabarit Excel correspondant.

Une copie du formulaire de soumission dûment rempli est envoyée au bureau de district, et pour chaque épreuve demandée, il faut acheminer au laboratoire une copie qui accompagne chaque échantillon.

Les formulaires doivent être soigneusement remplis. Toutes les copies doivent être lisibles.

Y inscrire tous les renseignements nécessaires, notamment ceux figurant sur les étiquettes d'oreille, les tatouages et les autres marques d'identification.

Consigner également le type d'épreuve demandée, ainsi que la date et le lieu du prélèvement.

Le vétérinaire accrédité doit inscrire son nom, son adresse (y compris son code postal) et son numéro de téléphone, en plus d'apposer sa signature au bas du formulaire.

Il faut aussi fournir le code de l'expéditeur et le code d'identification de notre bureau de district où se trouvent les animaux.

Un numéro de notification de laboratoire, qui est disponible par l'entremise d'un vétérinaire de district, doit être inscrit dans la section « Motif du test » du formulaire CFIA/ACIA 5473.

  • le laboratoire ne procédera pas à l'analyse si le numéro de notification est manquant

Il incombe au vétérinaire accrédité de fournir tous les renseignements demandés ou d'envoyer de nouveaux prélèvements lorsque les premiers ne satisfont pas aux exigences du laboratoire pour les épreuves demandées.

  • les laboratoires peuvent refuser d'analyser les prélèvements qui sont accompagnés de formulaires qui ne sont pas remplis correctement

Vous pouvez vous adresser au vétérinaire de district pour obtenir des exemples de formulaires remplis et pour vous informer au sujet de la distribution des formulaires devant accompagner les prélèvements envoyés à nos laboratoires.

Expédition des échantillons

Il est essentiel que les prélèvements soient acheminés au laboratoire approprié dans les délais exigés pour éviter les répercussions sur l'intégrité des échantillons et une potentielle reprise des échantillons.

  • en cas de doute, consulter le vétérinaire de district avant d'expédier les échantillons.

Lorsque des ampoules se brisent, il faut effectuer un nouveau prélèvement, ce qui retarde significativement l'obtention des résultats des épreuves.

  • l'expéditeur est tenu, légalement aussi bien que moralement, d'assurer la sécurité des personnes manipulant les échantillons au cours du transport et au laboratoire.

C'est pourquoi l'utilisation d'un emballage approprié est exigée pour l'acheminement de prélèvements à un laboratoire.

Le vétérinaire accrédité doit s'assurer que les méthodes d'emballage et d'expédition des échantillons sont conformes aux règlements en vigueur pour ce type d'échantillons.

Les formulaires de demande d'analyse qui accompagnent les prélèvements doivent être insérés dans une enveloppe qui sera ensuite apposée à l'extérieur de l'emballage de protection.

Ne jamais confier au propriétaire de l'animal ou à l'exportateur l'envoi des échantillons.

  • le vétérinaire accrédité doit être en mesure d'assurer le contrôle des échantillons qu'il expédie aux laboratoires

Le vétérinaire accrédité doit assumer les frais d'expédition.

Laboratoires

Les échantillons pour l'analyse de Campylobacter sont expédiés à notre laboratoire à Ottawa (Fallowfield).

Les échantillons pour l'analyse de Tritrichomonas doivent être expédiés à notre laboratoire à Saskatoon.

La liste de nos laboratoires est fournie au module 3.6 Laboratoires, à titre de référence.

Résultat des épreuves

Les résultats des épreuves effectuées dans nos laboratoires sont transmis au moyen du Système informatisé pour l'enregistrement et le suivi des analyses de laboratoire (SIESAL).

Les résultats sont acheminés au vétérinaire accrédité par l'intermédiaire du bureau de district local.

Le vétérinaire accrédité est responsable d'aviser le propriétaire du résultat.

Frais d'analyse de laboratoire

Le vétérinaire accrédité doit assumer les frais d'analyse de laboratoire.

Le bureau de district va facturer les frais applicables pour toute épreuve effectuée dans notre laboratoire, quel que soit le résultat de l'épreuve.

L'avis sur les prix de l'ACIA peut être consulté pour de plus amples informations.

3.4 Procédure particulière pour la soumission dans un laboratoire de l'ACIA

Quand un vétérinaire accrédité doit soumettre des échantillons pour analyse dans un laboratoire de l'ACIA pour :

  • des bovins testés en isolement de programme d'insémination artificielle (notification IAI),
  • pour exporter des moutons/chèvres, sangliers ou cervidés au Mexique ou
  • des bovins testés dans le cadre du PCCST-LBE

un tableur en format Excel doit être complété et envoyé électroniquement en plus de la copie papier du formulaire de soumission (CFIA/ACIA 5473; des bovins en isolement ou exportation au Mexique ou CFIA/ACIA 3841; PCCST-LBE) accompagnant les échantillons.

  • le gabarit pour chaque activité énumérée est disponible auprès du bureau de district de l'ACIA de votre région.

Ce tableur sera utilisé par les laboratoires de l'ACIA pour importer les données dans le Système informatisé pour l'enregistrement et le suivi des analyses de laboratoire (SIESAL). Il permettra d'éviter les erreurs de retranscription et sauvera du temps pour les soumissions contenant un nombre élevé d'échantillons.

Le gabarit doit être complété de la façon qui suit :

  • pour chaque soumission, un nouveau gabarit doit être complété.
  • aucune colonne ne peut être enlevée ou ajoutée, et le format prescrit doit être suivi.
  • les champs obligatoires dans le gabarit incluent le numéro d'échantillon, la date d'échantillonnage, le type d'échantillon, l'identification de l'animal (au minimum un des 6 champs d'identification doit être rempli) et la race.
    • indiquer l'âge dans la colonne N.
    • si l'âge est inconnu, cette colonne peut être laissée vide à condition de sélectionner dans la liste déroulante « Estimation » à la colonne L et de sélectionner dans la liste déroulante « Non fournie » dans la colonne M.
    • quelques champs ne sont pas applicables pour des tests en isolement ou pour l'exportation au Mexique.  Ils peuvent être laissés vides, mais ils ne peuvent pas être supprimés
  • on doit s'assurer de le sauvegarder sous un nouveau nom qui contient le numéro de référence du formulaire CFIA/ACIA 5473 auquel il sera associé (par exemple : 2014IEAB-0000079706-4).
    • pour les soumissions dans le cadre du PCCST-LBE, le nom du fichier doit contenir le nom de troupeau échantillonnés et la date de l'échantillonnage.
  • la soumission électronique du gabarit n'annule pas l'obligation de soumettre le formulaire de soumission en format papier avec les échantillons envoyés au laboratoire.
    • il est possible de compléter les premières deux pages du formulaire de soumission et d'y inscrire à la page 3 « voir liste ci-jointe » dans le tableau d'information sur les animaux.
      • pour être acceptable, cette liste jointe doit montrer toute l'information reliée à un animal en particulier sur la même page (utiliser la fonction « masquer » du tableur pour cacher des colonnes non requises)
      • le numéro de référence doit apparaître sur toutes les pages de la liste et chaque page doit être paraphée par le vétérinaire accrédité.

Le fichier Excel nommé correctement doit être acheminé par voie électronique à une adresse générique : cfia.labtemplate-gabaritlab.acia@inspection.gc.ca.

  • une copie doit aussi être soumise au bureau de district où les animaux étaient localisés lors du prélèvement.
  • chaque gabarit doit être envoyé dans un courriel distinct.
  • dans l'objet du courriel, inscrire uniquement le numéro de référence du formulaire CFIA/ACIA 5473 ou le nom du troupeau du PCCST-LBE.
  • dans le corps du courriel, mentionner si possible la date d'envoi de l'échantillon.
  • l'adresse courriel générique du laboratoire n'est pas associée à un laboratoire spécifique et ne peut être utilisée pour soumettre des demandes ou questions. Toute question doit être soumise au bureau de district.

3.5 Test de génotype pour la sensibilité à la tremblante

Ovins

L'analyse du génotype du gène prion a été déterminée comme étant un facteur significatif de la susceptibilité à l'infection par la tremblante classique chez les ovins. Il y a plus de chances de découvrir la maladie chez les ovins dans les génotypes présentant la plus grande susceptibilité (voir le tableau 1).

Le patrimoine génétique des ovins, comme celui de tous les mammifères, est constitué d'organismes diploïdes. Toutes les cellules contiennent 2 copies de chaque chromosome, et donc, 2 copies du gène qui code pour la protéine prion. Les gènes sont constitués de codons, un segment d'ADN qui détermine quel acide aminé particulier sera inclus à un endroit particulier d'une protéine (dans ce cas, la protéine prion). La protéine prion est composée de 256 acides aminés, il y a donc 256 codons déterminant ces acides aminés dans le gène de la protéine prion (PRNP).

Des études menées dans diverses régions géographiques et auprès de différentes races d'ovins ont révélé que 3 codons sont liés de façon plus significative à la susceptibilité à la tremblante classique : 136, 154 et 171. Les génotypes d'ovins au Canada sont désignés en utilisant ces numéros de codons et les 2 allèles correspondants associés au codon. Par exemple, 136 AV; 154 RR; 171 QR (également appelé ARQ/VRR en abrégé). En Amérique du Nord, on accorde une importance primordiale aux codons 136 et 171 en association avec la sensibilité à la tremblante classique.

Le profil du génotype prion d'ovins varie selon les pays, les troupeaux et les races. Bien qu'aucun génotype ne confère une résistance absolue à l'infection par la tremblante, la présence d'arginine (R) au codon 171 confère un niveau élevé de résistance à la tremblante classique. Inversement, la présence de glutamine (Q) au codon 171 est associée à la sensibilité.  Ceci est confirmé par le fait que parmi tous les moutons diagnostiqués avec la tremblante classique au Canada de 1998 à 2008, 93% étaient du génotype ARQ/ARQ, et plus de 98% étaient homozygotes 171QQ. De même, la majorité des cas de tremblante classique signalés dans le monde entier concernaient des moutons 171QQ.

Bien que rares dans la population ovine canadienne, l'histidine (H) ou la lysine (K) peuvent également se trouver au codon 171, mais toutes 2 sont actuellement considérées comme équivalentes à 171Q en termes de sensibilité.

L'acide aminé valine (V) au codon 136 confère une plus grande susceptibilité parmi la population 171QR. Le tableau 1 résume la sensibilité relative des génotypes ovins à la tremblante classique.

Tableau 1 Résumé de la sensibilité relative des génotypes de moutons en regard de la tremblante classique
Génotype (136, 171) Sensibilité à la tremblante classique
AA, RR Négligeable
AA, QR Très faible
AV, QR Intermédiaire
AA, QQ
AV, QQ
VV, QQ		 Élevée

Une découverte importante, en ce qui concerne la transmission de la tremblante, est que le génotype du fœtus influence la migration et l'accumulation de prions anormaux dans le placenta d'une brebis infectée. Une brebis infectée par le gène 171QQ portant un fœtus 171QQ entraîne l'accumulation de grandes quantités de prions anormaux, qui sont ensuite éliminés lors de la naissance ou de l'avortement. Cependant, lorsqu'une brebis infectée par la tremblante porte un fœtus 171QR ou 171RR, le prion anormal ne passe pas du côté fœtal du placenta. L'utilisation d'un bélier 171RR pour la reproduction peut donc prévenir l'excrétion du prion anormal à l'agnelage par les brebis infectées.

La connaissance de la résistance génétique à la tremblante classique a conduit à la mise en œuvre de programmes d'élevage dans plusieurs pays qui visent à réduire la sensibilité des troupeaux nationaux. Bien que la promotion intensive de l'utilisation de béliers 171RR à travers le Canada puisse être efficace pour minimiser la propagation de la tremblante, elle entraînerait également un changement significatif du profil génotypique du troupeau national. Actuellement, les données démographiques de la population ovine du Canada montrent une variation considérable des profils génotypiques de la tremblante entre les races et les troupeaux.

La sélection pour la résistance à la tremblante est un outil efficace de contrôle de la maladie qui peut être appliqué par les propriétaires. À ce jour, la sélection de génotypes résistants à la tremblante n'a pas été associée à des traits de production négatifs.

Il faut noter que la tremblante atypique ne suit pas la même association avec le génotype que celle décrite pour la tremblante classique et qu'elle a été détectée dans de nombreux pays, principalement par le biais de tests sur les animaux morts et de programmes de surveillance active de la tremblante. Bien que l'on parle maintenant de tremblante atypique, les cas étaient initialement appelés Nor98, car le premier cas a été identifié en Norvège en 1998. La tremblante atypique semble être cliniquement, pathologiquement, biochimiquement et épidémiologiquement sans rapport avec la tremblante classique et ne constitue donc pas un risque connu de propagation puisqu'elle est limitée à cet animal individuel.

Chèvres

Au cours des dernières années, l'ACIA a évalué les preuves de la résistance génétique à la tremblante classique chez les chèvres. Les données génotypiques obtenues de plusieurs troupeaux de chèvres infectés par la tremblante au Canada, combinées aux résultats des recherches en cours en Amérique du Nord et en Europe, fournissent des preuves convaincantes de la résistance génétique chez les chèvres.

L'ACIA travaille actuellement à l'incorporation de l'utilisation des allèles de résistance génétique S146 et K222 chez les chèvres dans notre Programme national d'éradication de la tremblante (PNES) au Canada. Cette démarche est conforme à celle de nos partenaires commerciaux, les États-Unis (US) et l'Union européenne (UE). À l'échelle internationale, d'autres pays touchés par la tremblante (y compris les États-Unis) ayant des programmes d'éradication ont commencé à utiliser ces produits dans leurs programmes nationaux.

D'autres recherches dans le contexte canadien sont encore nécessaires pour les génotypes de chèvres et la résistance à la tremblante, et seront effectuées par le biais d'un projet pilote visant à évaluer la résistance à la tremblante dans les troupeaux de chèvres positifs.

Procédures d'échantillonnage pour le génotypage

Les échantillons prélevés pour le génotypage aux fins du Programme national de certification des troupeaux à l'égard de la tremblante (PCTT) ou pour l'exportation vers les États-Unis doivent être prélevés par un vétérinaire accrédité. Des identifiants approuvés sont requis sur les moutons faisant l'objet d'un génotypage et le numéro d'identification officiel (15 chiffres) doit être inclus dans la soumission de l'échantillon.

Ponction veineuse jugulaire

Ponction veineuse jugulaire

Pour faciliter le prélèvement rapide d'échantillons sanguins sur plusieurs moutons en un minimum de temps, il est suggéré de ne pas perdre de temps à relever les moutons. Immobilisez les moutons pour la ponction veineuse en position debout.

Tout en bloquant l'orifice supérieur du thorax, trouver par palpation ou par approximation l'emplacement de la veine jugulaire et y introduire l'aiguille du Vacutainer.

Pour chaque animal, on utilisera une aiguille uniservice afin d'éviter la contamination croisée d'ADN.

Prélever de 7 à 10 ml de sang dans un tube (à bouchon lilas ou violet) contenant de l'acide éthylènediaminetétracétique (EDTA).

S'assurer que les paramètres d'identification de l'échantillon et de l'animal correspondent de manière irréfutable.

Les échantillons doivent être conservés à 4 °C jusqu'à leur expédition. Les envoyer au laboratoire le plus tôt possible.

Le Module 3.2 de ce manuel fournit des instructions détaillées sur l'emballage, l'expédition et la soumission des échantillons sérologiques.

Les échantillons collectés dans le cadre du Programme de certification des troupeaux (PCTT)à l'égard de la tremblante doivent être soumis à un laboratoire figurant dans l'annexe G du Module 7.5 de ce manuel.

Les échantillons collectés en vue d'une exportation vers les États-Unis doivent être soumis au National Veterinary Services Laboratory (NVSL) ou à un autre laboratoire désigné par le NVSL pour vérifier le génotype. Sélectionnez "Ovine PrP Genotyping" sur le lien – (en anglais seulement) pour accéder aux informations du laboratoire.

Échantillons de tissus alternatifs

L'analyse du génotype peut être effectuée sur des tissus autres que le sang total, à condition que le laboratoire agréé ait été évalué et approuvé pour l'analyse du type de tissu soumis (par exemple, une biopsie de la peau). Il incombe au vétérinaire accrédité de confirmer quelles analyses de tissus sont offertes dans le cadre des fonctions du laboratoire agréé.

3.6 Laboratoires

Laboratoires approuvés par l'ACIA

Les laboratoires approuvées pour le dépistage de l'Anemie infectieuse des équidés (AIÉ) et de la brucellose – Épreuve d'agglutination sur plaque à l'antigène tamponné (BPAT).

Il suffit de sélectionner la maladie et/ou le type de test dans l'option filtre pour obtenir la liste la plus récente des analyses disponibles.

Laboratoires de l'Agence canadienne d'inspection des aliments

En santé animale, les services de laboratoire de l'Agence canadienne d'inspection des aliments (ACIA) sont assurés par un réseau de centres d'expertise. Chaque élément de ce réseau représente le centre national dans son domaine de spécialisation.

Les centres d'expertise se trouvent dans les laboratoires de l'ACIA:

Laboratoire de l'ACIA - Lethbridge
(Institut de recherche vétérinaire)

Laboratoire de l'ACIA – Saskatoon
(Centre de parasitologie alimentaire et animale)

Laboratoire de l'ACIA – Winnipeg
(Centre national des maladies animales exotique, Centre scientifique canadien de la santé humaine et animale)

Laboratoire de l'ACIA – Ottawa (Fallowfield)

Laboratoire de l'ACIA – Sainte Hyacinthe
(Laboratoire d'hygiène vétérinaire et alimentaire)

3.7 - Critères de rejet dans les laboratoires de santé des animaux de l'ACIA pour les échantillons et les formulaires de soumission

L'ACIA et les laboratoires approuvés par l'ACIA doivent respecter les normes d'assurance de la qualité lors de la réception et de l'analyse de tous les échantillons reçus.

Les laboratoires approuvés par l'ACIA établissent leurs propres critères internes pour le rejet d'échantillons reçus, et ont des protocoles en place pour informer les envoyeurs du rejet d'échantillons et des raisons de ce rejet.

  • ces critères peuvent être obtenus directement auprès du laboratoire spécifique approuvé par l'ACIA.

Pour les échantillons soumis aux laboratoires de l'ACIA, les critères de rejet sont énumérés dans les tableaux suivant.

  • les raisons du rejet peuvent être liées à l'échantillon lui-même ou au formulaire de soumission de l'échantillon.
  • l'avis de rejet des échantillons sera envoyé au vétérinaire accrédité par l'intermédiaire du bureau de district de l'ACIA et comprendra le numéro de référence de la soumission, le(s) numéro(s) d'ampoules(s) des échantillons rejetés (si applicable) et la raison du rejet.
  • en fonction de la raison du rejet, le vétérinaire accrédité devra prendre les mesures correctives appropriées pour le ou les échantillons et/ou pour le formulaire de soumission afin de permettre les tests.

A – général pour tout type d'échantillon

No. Critères de rejet pour les échantillons Résultat sur le Rapport d'analyse (RA) Commentaires
A1 Contamination Impropre
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau formulaire de soumission (FS) sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Contamination : échantillon montrant l'une ou plusieurs des conditions suivantes : turbidité, opacité, mucoïde, gélatineux, mauvaise odeur, coloration brunâtre, évidence de croissance bactérienne ou de matériel étranger dans l'échantillon (par exemple : fèces, poil, terre).
A2 Type d'échantillon ou de contenant inadéquat Impropre
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Exemple : sang au lieu de sérum, tube avec bouchon vert au lieu de rouge, échantillon soumis dans un milieu inadéquat, échantillon laissé dans le milieu lorsqu'il devait être retiré, etc.
A3 Aucun ID sur le contenant de l'échantillon (ampoule/sac) Impropre
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
A4 Erreur dans un ID Impropre
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
A5 Échantillon en double Impropre
  • Si 2 échantillons portent le même ID dans une série d'échantillons, le laboratoire ne peut pas assumer lequel est le bon (par exemple : choisir l'un des 2 pour le test). Le laboratoire doit considérer les échantillons soumis en double impropres tous les 2.
A6 Échantillon manquant Aucun échantillon reçu
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Si un laboratoire doit effectuer 2 tests et ne reçoit qu'un seul échantillon là où le document « Tests et analyses de santé animale effectués dans les laboratoires de l'ACIA » spécifie qu'un échantillon est requis par test, le laboratoire indiquera 1 échantillon reçu pour un test et indiquera, pour le second test, aucun échantillon reçu.
A7 Échantillon excédentaire Échantillon non testé
  • Aucune communication préalable ne sera faite avec l'envoyeur avant que l'échantillon soit mis de côté.
  • Exemple : un laboratoire reçoit un FS listant les échantillons 1 à 6 et des échantillons identifiés 1 à 7 sont dans la boîte. L'échantillon numéro 7 ne sera pas testé.
A8 Ampoule brisée Brisée sur réception
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
A9 Quantité/Volume Insuffisant Quantité insuffisante
  • Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur). Cela inclut : sérum, sang, paillette de semence, grammes de tissu, etc.
  • Vous référez au document « Tests et analyses de santé animale effectués dans les laboratoires de l'ACIA » pour connaître les volumes/quantités requis.
A10 Séries d'échantillons portant le même ID dans une même boîte. Impropre
  • Si 2 séries d'échantillons ou plus sont envoyées dans une même boîte, et si certains échantillons portent le même ID, ces échantillons sont déclarés impropres.

B – échantillons de sérologie

No. Critères de rejet pour les échantillons Résultat sur le Rapport d'analyse (RA) Commentaires
B1 Lipémie Impropre
  • Ne convient pas pour le test. Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l' échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Lipémie : échantillons ayant un aspect laiteux.
  • Remarque : les aliquots peuvent ne pas être égaux en terme de lipémie et la lipémie peut être un problème que pour certains tests.
B2 Hémolyse Impropre
  • Ne convient pas pour le test. Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l' échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Hémolyse : échantillon de sérum ayant une couleur variant du rouge au bourgogne due à la lyse des érythrocytes.
  • Remarque : les aliquots peuvent ne pas être égaux en terme d'hémolyse et l'hémolyse peut être un problème que pour certains tests.
B3 Caillot de Fibrine (échantillons aviaires) Impropre
  • Ne convient pas pour le test. Les caillots rendent impossible la récupération de sérum pour le test. Un nouvel échantillon est requis (incluant un nouveau FS sauf si une portion de l'échantillon original (du même prélèvement) peut être fourni par l'envoyeur).
  • Remarque : les caillots de fibrine peuvent se former pendant le transport de l'échantillon.

C – échantillons pour l'encéphalopathie spongioforme bovin (ESB)

Remarque : les tests ESB ne sont pas effectués dans le cadre du Programme des vétérinaires accrédités, mais des vétérinaires accrédités peuvent participer au prélèvement de ces échantillons au nom de l'ACIA.

No. Critères de rejet pour les échantillons Résultat sur le Rapport d'analyse (RA) Commentaires
C1 Échantillon endommagé Non testé – Pas d'échantillon soumis
  • Le tronc cérébral situé au niveau de la région de la medulla oblongata/obex a été tranché/coupé. Lorsque le dommage est important à un point où l'obex ne peut plus être identifié, l'échantillon est appelé « Endommagé, Pas d'obex » et le résultat entré pour cet échantillon est « Non testé – Pas d'échantillon soumis ».
C2 Échantillon autolysé Non testé – Échantillon inadéquat
  • Altération du tissu par les enzymes intrinsèques. Quand le degré d'autolyse est tel que les régions du tronc cérébral ne peuvent plus être identifiées, l'échantillon est appelé « Autolysé – Impropre »
C3 Type inadéquat d'échantillon Non Testé – Pas d'échantillon soumis
  • Lorsqu'une région inadéquate du système nerveux est envoyée telle que : moelle épinière, cervelet, cortex cérébral, etc.
  • Aucune de ces régions n'est acceptable et ce, même si un historique clinique est fourni.

D – autres types spécifiques d'échantillons

Remarque : Ces spécifications s'appliquent aux échantillons prélevés pour les tests de routine et sont un extrait du document Tests et analyses de santé animale effectuées dans les laboratoires de l'ACIA

No. Critères de rejet pour les échantillons Résultat sur le Rapport d'analyse (RA) Commentaires
D1 Influenza aviaire Impropre
  • Pool : sérum groupé
  • Écouvillons (swabs) : milieu de transport universel (MTU) contenant les écouvillons, mélange d'écouvillons cloacaux et trachéaux dans le même MTU.
D2 Paramyxovirus aviaire (maladie de Newcastle) Impropre
  • Écouvillons (swabs) : MTU contenant les écouvillons, mélange d'écouvillons cloacaux et trachéaux dans le même MTU.
D3 Diarrhée virale bovine Impropre
  • État : sérum gelé pour le test d'isolation (ISOL), semence pas gelée et pas envoyée dans l'azote liquide.
D4 Campylobacter fetus Impropre
  • Âge : échantillon plus vieux que 48 heures.
  • Température : température de l'échantillon hors de la plage 18 °C à 37 °C.
D5 Métrite contagieuse équine Impropre
  • Âge : échantillon plus vieux que 48 heures.
  • État : échantillon gelé pour test de culture.
D6 Cysticercose Impropre
  • État : échantillon gelé.
D7 Elaphostrongylus cervi Impropre
  • État : échantillon gelé.
D8 Embryons obtenus par fécondation in vitro – isolement viral Impropre
  • État : échantillon pas gelé et pas envoyé dans l'azote liquide.
D9 Rhinotrachéite infectieuse bovine Impropre
  • État : semence pas gelée et pas envoyée dans l'azote liquide.
D10 Mycoplasmes Impropre
  • Âge : échantillon plus vieux que 48 heures pour le test de culture.
  • État : semence pas gelée et pas envoyée dans l'azote liquide.
D11 Salmonellose Impropre
  • Âge : échantillon plus vieux que 48 heures pour le test de culture.
D12 Trichomonose (Tritrichomoniase) Impropre
  • Age : échantillon plus vieux que 120 heures pour le test de culture.
  • Température : température de l'échantillon hors de la plage 10 °C à 37 °C.
D13 Rhinotrachéite virale du dindon Impropre
  • Pool : sérum groupé
  • Écouvillons (swabs) : MTU contenant les écouvillons, mélange d'écouvillons cloacaux et trachéaux dans le même MTU.
D14 Tous les tests pour Histopathologie (exemple : Cysticercose, TB) Impropre
  • État : échantillon gelé.

3.8 Résultats des épreuves

Il incombe au vétérinaire accrédité de communiquer les résultats d'épreuves au propriétaire.

Les résultats des épreuves effectuées dans des laboratoires de l'ACIA sont transmis au moyen du Système informatisé pour l'enregistrement et le suivi des analyses de laboratoire (SIESAL).

  • les résultats sont acheminés au vétérinaire accrédité par l'intermédiaire du bureau de district local.

Les résultats des épreuves effectuées dans des laboratoires approuvés par l'ACIA sont habituellement envoyés directement au demandeur et au bureau de district de l'ACIA.

Pour plus de détails sur la distribution des résultats de test lorsqu'un système de certification numérique pour l'AIE approuvé par l'ACIA est utilisé, référer au Module 3.2A.

Les résultats d'épreuves effectuées dans les laboratoires privés sont habituellement transmis directement au demandeur seulement. Le vétérinaire accrédité fournira à l'ACIA, sur demande, une copie des résultats de ces tests.

Il faut expédier les prélèvements sans tarder pour être assuré de recevoir les résultats en temps voulu.

les délais d'exécution pour les échantillons testés sont relatifs au jour où les échantillons sont reçus par le laboratoire.

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